【摘 要】
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目的:(1)厘清历代本草中西洋参的名称、基原、产地、品质等内容,为道地西洋参药材的品质评价、引种驯化、资源评估等提供文献依据;(2)比较研究原产/引种西洋参“优形优质”的差异,为揭示中药道地性有其特有的物质基础,即独特的“道地药材化学型”奠定基础;(3)利用西洋参不定根受控平台,研究植物激素与人参皂苷互作对不定根生长发育的影响,为次生代谢产物参与西洋参“优形优质”的调控提供科学依据。方法:(1)基
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目的:(1)厘清历代本草中西洋参的名称、基原、产地、品质等内容,为道地西洋参药材的品质评价、引种驯化、资源评估等提供文献依据;(2)比较研究原产/引种西洋参“优形优质”的差异,为揭示中药道地性有其特有的物质基础,即独特的“道地药材化学型”奠定基础;(3)利用西洋参不定根受控平台,研究植物激素与人参皂苷互作对不定根生长发育的影响,为次生代谢产物参与西洋参“优形优质”的调控提供科学依据。方法:(1)基于文献考证及文献调研,进行西洋参的应用历史沿革及其“优形优质”考;(2)通过统计原产、引种西洋参药材侧根数及直径,明确不同产地西洋参“优形”差异;通过UPLC-Q-TOF-MS比较原产与引种西洋参的主根、侧根、整根的化学成分,明确不同产地西洋参“优质”差异;(3)建立西洋参不定根平台,绘制不定根生长曲线;利用UPLC-Q-TOF-MS测定并明确西洋参不定根与原植物的主根、侧根化学成分差异;为后续可以利用不定根平台验证西洋参“优形优质”提供科学依据;(4)利用植物激素细胞分裂素及人参皂苷处理西洋参不定根,利用根系全景扫描仪与图像处理软件测定不同处理组西洋参不定根分支数、平均直径变化;利用UPLC-MS/MS技术检测各处理组西洋参不定根中人参皂苷Rg1、Rb1、Re 3个主要化学成分含量变化,并进一步测定各处理组不定根中植物激素含量的变化;分析细胞分裂素和人参皂苷对西洋参不定根生长发育的影响。结果:(1)文献研究得出:西洋参原产地是北美,经引种于20世纪80年代在我国栽培成功,后栽培面积不断扩大,近现代产区主要集中在东北、山东、北京等地;西洋参产地存在一定变迁,其资源的利用演变大致经过野生、驯化、引种3个阶段;野生西洋参以横灵体、表面灰褐色、横纹紧密、断面黄白色、体轻质硬、气清香浓,味苦微甘者为佳。栽培西洋参以根条均匀、横纹紧密、体重坚实、气味浓者为佳。(2)与引种西洋参相比,原产西洋参药材侧根数目和直径均有极显著性增加;原产西洋参药材主根的人参皂苷Ro、Rd2、F2、Rg1、Rh1含量显著高于引种西洋参药材的主根;原产西洋参药材的侧根的人参皂苷Ro、Rd2、F2、Rg1含量显著高于引种西洋参药材的侧根;原产西洋参药材的整根(除去芦头、须根)的人参皂苷Rd、Ro、Rd2、F2、Rg1、Rh1、Rh2含量显著高于引种西洋参药材的整根;与引种西洋参相比,无论是原产西洋参药材的主根、侧根还是整根(除去芦头、须根)的Rg1/Re、Rg1/Rb1均显著增加。(3)西洋参不定根生长曲线呈“S”型,接种后的20天内为潜伏期,生长速度较慢;10天后为指数生长期,西洋参不定根生长活跃增殖;从第35天开始进入平台期,其鲜重(FW)和干重(DW)增加量达到峰值,持续到第65天。化学成分分析结果表明,西洋参不定根的Rg1/Re、Rg1/Rb1比值显著高于西洋参原植物,且不定根中人参皂苷Rf含量显著高于西洋参原植物的主根、侧根。(4)外源添加细胞分裂素(ZT)处理西洋参不定根,10μM ZT处理下不定根分支显著被抑制、直径增粗,该表型与引种西洋参表型大体一致;不同浓度处理后西洋参不定根中的人参皂苷Rb1、Re、Rg1含量均降低,且内源细胞分裂素含量增加。(5)不同浓度的人参皂苷Rg1、Re、Rb1处理后,低浓度下西洋参不定根分支数增多、直径增大,人参皂苷含量及内源激素也发生不同程度的变化。结论:(1)通过比较原产和引种西洋参药材的表型及成分组成、成分组成比例,发现原产西洋参药材侧根数目和芦头下1 cm处的直径均大于引种西洋参,原产西洋参药材的人参皂苷Rg1/Re、Rg1/Rb1显著高于引种西洋参药材,可作为道地性药材“优形优质”特征指标;(2)西洋参不定根平台稳定、可控,不定根中可检测到人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rf等成分,其中人参皂苷Rf含量显著高于西洋参原植物主根、侧根,人参皂苷Rg1、Re及Rb1含量较原植物较低。由于不定根生长周期短、遗传背景单一,因此可以作为受控实验的理想材料;(3)利用西洋参不定根受控平台实验,验证并初步得出植物激素细胞分裂素与人参皂苷互作调控西洋参根的生长,为进一步深入阐释道地药材“优形优质”的遗传机制奠定基础。
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