目的建立苯甲酸雌二醇联合缩宫素诱发的大鼠原发性痛经模型,并基于此模型对芍药甘草汤血中移行成分进行了药代动力学研究,阐明芍药甘草汤主要血中移行成分的药动学特征,从整体上揭示方剂芍药甘草汤治疗原发性痛经的血中主要移行成分的体内动态变化过程,为深入研究芍药甘草汤治疗原发性痛经的药效物质基础提供依据。方法本实验采用苯甲酸雌二醇联合腹腔注射缩宫素诱导大鼠痛经模型,通过生化指标检测、扭体观察和体重的实时监测,对痛经模型进行评价。大鼠痛经模型制备成功后,于大鼠原发性痛经模型上对芍药甘草汤血中移行成分经时变化行为较好的四种成分进行药代动力学研究。利用UPLC-MS技术,采用 1.7 μm粒径的C18键合硅胶为填充剂,以乙腈-水加0.1%甲酸为流动相,采用串联质谱对多个目标成分同时进行扫描测定,所得药-时浓度数据采用WinNonlin 6.1药动学软件按非房室模型进行处理。结果1.原发性痛经模型的制备与评价复制苯甲酸雌二醇联合缩宫素诱导的大鼠痛经模型,造模第15天模型组大鼠腹腔注射缩宫素半小时内的扭体率与对照组相比为100%,并对生理生化指标进行检测,结果显示模型组大鼠ET、E2、PGF2a、PGE2含量明显增高,NO、β-EP、P含量明显降低,空白组和对照组大鼠在模型复制期间体重缓慢升高,而模型组大鼠在第6天检测时体重呈下降趋势,表明雌激素对大鼠的状态有影响。证明了通过苯甲酸雌二醇注射液和缩宫素诱发的大鼠扭体痛经模型制备成功,即在后续实验中可以运用此方法复制大鼠痛经模型。2.基于大鼠原发性痛经模型的芍药甘草汤的药代动力学研究基于原发性痛经模型,优选出具有较好体内行为特性的甘草苷、异甘草素、没食子酸和芒柄花黄素作为芍药甘草汤主要血中移行成分进行药代动力学研究。药动学参数结果显示四种成分的Tmax在60-90min之间,表明其整体吸收迅速,从Cmax可以看出芍药甘草汤血中主要移行成分最大吸收浓度依次是:芒柄花黄素>没食子酸>异甘草素>甘草苷。其中芒柄花黄素的浓度远远高于其他成分Cmax为0.81μg/ml,没食子酸和异甘草素浓度相近为0.29μg/ml和0.11 μg/ml,甘草苷浓度最低为0.04 μg/ml。同时在检测时间内进入体循环的药AUC0-t大小依次是没食子酸>异甘草素>芒柄花黄素>甘草苷。四种化合物的MRT 2.4-10h,体内滞留较长有利于药效的发挥,整体结果表明,四种成分具有吸收迅速,AUC较大,消除慢等特点,阐明了基于原发性痛经模型的芍药甘草汤血中移行成的药动学特征。结论:本实验成功建立了大鼠原发性痛经模型并优选出评价指标。采用苯甲酸雌二醇联合缩宫素诱导大鼠痛经模型,通过直观的行为学分析得到与空白组相比痛经模型大鼠扭体率为100%,且体重在模型建立期间维持不变,以及传统的生化指标检测等,对建立的痛经模型进行评价,证明了通过苯甲酸雌二醇注射液联合缩宫素诱发的大鼠扭体为痛经模型制备已成功。芍药甘草汤治疗原发性痛经的体内四种主要血中移行成分没食子酸、甘草苷、异甘草素、芒柄花黄素具有吸收入血快、AUC较大、消除慢等药动学特征,并能快速广泛地分布于各个组织中,而迅速发挥药效。从整体上揭示方剂芍药甘草汤治疗原发性痛经的主要血中移行成分体内动态变化,体现复方芍药甘草汤治疗原发性痛经的体内直接作用物质的体内过程。为中药复方芍药甘草汤治疗原发性痛经药效物质基础的体内过程规律研究提供依据。