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目的:探讨强骨康疏方总提取物对体外培养破骨细胞(Osteoclast,OC)分化、酶活性的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:制备强骨康疏方水提物,以OC前体细胞-小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7为研究对象,选取5-10代的RAW264.7细胞经适应性培养后,CCK-8法分析该方对细胞活力的影响;将细胞分为阴性对照组、模型对照组、强骨康疏方低、中、高剂量药物组,除阴性对照组外,其他实验组均加入终浓度为50ng/ml的核因子κB受体活化因子配体(Receptor Activator of Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL)为OC诱导剂,同时,药物组加入不同浓度的强骨康疏方提取物(50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)进行干预。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察各组细胞TRAP阳性多核细胞的数量;比色法试剂盒测定各组TRAP酶活性数值;实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测各组细胞TRAP、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)、活化T-细胞核转录因子c1的基因表达。结果:强骨康疏方提取物在终浓度为3.125μg/ml-800μg/ml的范围内对RAW264.7细胞活性无明显影响,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。TRAP染色结果:阴性对照组未发现染色阳性、细胞核≥3的OC细胞,与之相比,模型对照组的阳性多核巨型细胞明显增多(P<0.05),药物干预组的阳性细胞明显减少,但无剂量依赖性,以100μg/ml的阳性细胞数最少,结果具有统计学意义(P<0.05)。比色法检测TRAP酶活性结果:与阴性组比较,模型组酶活性显著升高(P<0.05),与模型组相比,强骨康疏组酶活性有所下降,且以100μg/ml组更为显著(P<0.05)。qRT-PCR实验结果:与阴性组比较,模型组TRAP、MMP-9、NFATc1的基因表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,强骨康疏组三种基因表达有所降低,且以100μg/ml组更为显著(P<0.05)。结论:强骨康疏方总提取物能够有效抑制OC的生成,抑制骨破坏相关酶类的活性。其机制可能是通过下调TRAP、MMP-9以及OC分化关键转录因子NFATc1的表达来实现。