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研究背景随着对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, ox-LDL)参与动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)形成和发展的学说认识的加深,国内外学者已经将抗氧化剂用于抗AS的研究。其中普罗布考是FDA唯一认证的抗氧化药物,最初以降脂药应用于临床,近几年发现其具有抗氧化、降脂外的其他作用,如改善血管内皮功能、抑制平滑肌细胞增殖等。动物实验及临床研究显示普罗布考具有抗AS作用,但其具体作用机制尚未完全阐明。血红素加氧酶(Heme Oxygenase, HO)系统是血红素氧化的起始酶和限速酶,其主要功能是分解血红素生成胆绿素、一氧化碳和游离铁,胆绿素随后被进一步还原成胆红素,游离铁与转铁蛋白结合。HO在体内有HO-1、HO-2、HO-3三种同工酶。HO-1为诱导型,广泛分布于脾脏、肝脏、网状内皮系统和骨髓等组织,能在血管内皮细胞和平滑肌细胞中低水平地表达。现已证实,HO-1是一种应激蛋白,在应激状态下适量表达可以减轻细胞损伤、蛋白质氧化及脂质过氧化。近来的动物实验表明,增加HO-1表达可明显减轻AS病变程度；临床研究亦发现,人类HO-1表达水平与冠心病发病和冠脉支架术后再狭窄相关,更体现HO-1在AS中的重要作用。最近有国外文献报道,普罗布考可在动物体内外上调HO-1mRNA的表达,因此我们推测,普罗布考有可能通过诱导HO-1的产生进而发挥其抗AS作用。本研究通过建立兔腹主动脉粥样硬化模型,应用锡原卟啉-9抑制体内HO-1的活性,观察斑块形态、组成及血清氧化、炎性因子的水平,进一步研究普罗布考对斑块进展及稳定性的影响,探讨HO-1在普罗布考抗动脉粥样硬化作用机制中的地位。研究目的(1)建立兔腹主动脉AS模型；(2)研究在AS发生发展中,口服普罗布考对主动脉壁内HO-1表达及活性的影响；(3)通过检测血清中氧化因子、炎症因子的水平,观测斑块的病理形态及组成,探讨普罗布考抗AS的作用；(4)探讨HO-1在普罗布考抗动脉粥样硬化作用中的地位,为AS的临床防治提供理论和实验依据。研究对象及方法高脂饮食加腹主动脉内膜剥脱术建立兔动脉粥样硬化模型后,60只成模雄性新西兰兔随机分为高脂对照组、锡原卟啉-9(SnPP-IX,HO-1抑制剂)组、普罗布考组、普罗布考+SnPP-Ⅸ组,每组15只,持续药物干预12周,24周末检测各组血脂,血清中氧化低密度脂蛋白、白介素-18、基质金属蛋白酶-9和超敏感C反应蛋白的水平；观测斑块的病理形态及组成；通过免疫组织化学法观察腹动脉组织中HO-1的表达,实时定量RT-PCR检测HO-1mRNA的表达,酶法检测HO活性的变化。结果与对照组相比,普罗布考组斑块内HO-1的表达及活性显著增加,主动脉斑块面积、内-中膜厚度显著减小,斑块纤维帽厚度增加,斑块内巨噬细胞浸润减少,血清中氧化低密度脂蛋白及炎症因子的水平降低(P均<0.01)。使用锡原卟啉-9抑制HO-1的产生及活性,促进了斑块的进展,增加了血浆中氧化及炎症因子的水平(P均<0.01)。普罗布考干预的同时抑制HO-1的活性,显著减弱了普罗布考的抗动脉粥硬化作用(各项检测指标普罗布考组VS.普罗布考+SnPP-Ⅸ组,P均<0.01)结论普罗布考通过诱导HO-1产生发挥其抗炎、抗氧化作用,从而抑制动脉粥样硬化进展,增加斑块的稳定性。HO-1可能是普罗布考抗动脉粥样硬化的作用靶点。