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目的非血缘脐血移植(unrelated cord blood transplantation,UCBT)有较低的移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)发生率[1,2]和独特的抗白血病作用[3,4]。然而,UCBT也被报道与植入延迟和T淋巴细胞重建不良所导致的感染风险增加有关[5-7]。T淋巴细胞与移植后感染、移植物抗白血病作用、GVHD发生等密切相关,实现移植后快速且完全的T淋巴细胞重建是移植成功的关键。本研究旨在观察UCBT后T淋巴细胞及其受体重建情况。方法选择非去T细胞清髓性预处理的UCBT患者进行移植后T淋巴细胞监测。本实验分两部分进行。第一部分:流式细胞术监测UCBT后1年内不同时间点的T淋巴细胞(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD4+CD25+CD127low)重建,时间点设为移植后1、3、6、9和12个月,同时纳入10例健康体检者作为对照;第二部分,高通量二代测序(next generation sequencing,NGS)技术监测3例成人UCBT后TCR库多样性重建,时间点设为移植后3、6、9和12个月,同时选择4例健康成人外周血作为对照。结果本实验揭示了非T淋巴细胞去除的清髓性单份UCBT治疗急性白血病患者的T淋巴细胞重建特点,并首次在此移植模型中对移植后TCR重建进行探索,实验结论如下:第一部分:UCBT后T淋巴细胞及其亚群重建(1)T淋巴细胞及其亚群的变化:UCBT后第3个月T淋巴细胞恢复至正常范围。其中CD8+T细胞在移植后3个月恢复至正常范围,而CD4+T细胞在移植后6个月恢复至正常。UCBT后CD8+T细胞较CD4+T细胞恢复快。(2)Treg淋巴细胞的变化:UCBT后Treg细胞重建较慢,至移植后12个月仍未恢复至正常范围。(3)年龄对T淋巴细胞及其亚群的影响:未成年组(<18Y)Treg细胞较成年组(≧18Y)恢复快,然而未成年组T淋巴细胞较成年组T淋巴细胞呈现较慢的恢复趋势。UCBT后两个年龄组不同时间点的CD8+T细胞和CD4+T细胞的差异均无统计学意义。第二部分:TCR多样性重建:UCBT后TCR重建慢,CD4+TCR和CD8+TCR的每百万细胞唯一CDR3总数在移植后3至6个月达到正常参考范围,并且都出现明显的优势克隆表达。CD4+TCR多样性恢复明显较CD8+TCR多样性恢复快。结论1,非去T淋巴细胞(不含ATG)清髓性UCBT后T淋巴细胞在移植后3个月可达正常,其中CD8+T淋巴细胞较CD4+T淋巴细胞恢复快,分别在移植后3个月和6个月达到正常;2,UCBT后Treg恢复较慢,至移植后1年仍未达到正常。年龄小于18岁有利于Treg细胞的恢复。3,CD4+TCR多样性明显较CD8+TCR多样性恢复快,CD4+TCR库多样性在移植后3至9个月开始达到正常参考值,而CD8+TCR多样性恢复较慢,至移植后12个月仍未达正常参考值。CD4+TCR和CD8+TCR的CDR3序列均出现优势克隆表达。