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化学耐药性是癌症治疗中一个亟待解决的重要问题。研究表明，在抗癌药物作用下，细胞内将产生大量的双链断裂，这将启动一种高效的DNA修复机制，促进基因组重排，导致肿瘤细胞幸存从而引发细胞化学耐药性。因此，深入研究DNA修复机制对攻克癌症有着重大而实际的意义。Purα是一个与单双链DNA或RNA高度亲和蛋白质。在肿瘤发生机制的相关研究中表明Purα蛋白能与pRb，E2F1等蛋白因子相互作用，因而PURA被视为一种潜在抑癌基因。另有研究表明，Purα蛋白参与某些化疗药物所产生的DNA损伤修复过程。然而，该蛋白在损伤修复过程中的功能并不明确。此外，本实验室前期研究发现体内Purα蛋白复合物经质谱鉴定结果中包含Ku70/80等蛋白组分，这表明Purα可能与Ku70/80蛋白存在相互作用，并且该蛋白异聚体参与DNA双链断裂所引发的非同源末端连接过程中的功能研究已经非常明确。因此，本文通过相关实验研究Purα与Ku70/80蛋白是否存在相互作用，并深入地对不同抗癌药物作用后Purα蛋白所产生的损伤修复机制展开相关研究。本课题以稳定高表达Purα蛋白的293T细胞株为材料，运用免疫共沉淀技术证明Purα蛋白与Ku70/80蛋白存在相互作用，进一步构建酵母双杂交实验所需的pGADT7-KU80、pGBKT7-KU80、pGADT7-KU70和pGBKT7-KU70质粒，并分别转化酵母细胞，为后续Mating实验做准备。MTT实验在一定程度上表明高表达Purα蛋白使细胞对阿霉素和甲烷磺酸甲酯药物的敏感性降低；免疫激光共聚焦实验表明在阿霉素处理下，Purα蛋白与Ku70/80蛋白在核内共定位，Purα蛋白入核明显，并且核内Purα蛋白与Ku70/80蛋白含量明显增高。实验结果均表明Purα蛋白参与阿霉素作用而引发细胞的损伤修复过程，可能与Ku70/80蛋白及其他蛋白因子共同参与并协助修复过程的完成。此外，稳定低表达Purα蛋白的Hela和U2OS细胞株的筛选，为进一步实验奠定基础。