背景:胶质母细胞瘤（GBM）细胞的快速迁移和高侵袭性,导致手术难以完全切除,肿瘤易复发。MLK3和PI3K p110β亚基均是肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭中重要的调控因子,但仍不清楚这两者间是否存在协同调控作用。前期研究中发现,靶向PI3Kβ与JNK,可通过调控板状伪足和膜褶皱的形成,以及Akt和FAK的活性,协同抑制胶母瘤细胞的体外增殖和迁移,以及体内移植瘤的生长。鉴于MLK3可激活JNK、p38和ERK信号通路,因此我们推测,靶向MLK3与PI3K β对胶母瘤细胞的迁移和侵袭也有协同抑制作用。目的:探究MLK3协同PI3K β调控胶质母细胞瘤细胞迁移机制。方法:利用PI3K β和MLK3的特异性抑制剂AZD6482和URMC-099,在胶质母细胞瘤细胞中进行Transwell小室细胞侵袭实验,评价单独及联合靶向PI3K β和MLK3对GBM细胞迁移和侵袭功能的影响。运用细胞免疫荧光方法,标记黏着斑标记蛋白,在激光扫描共聚焦显微镜下观察拍照观察其变化。通过western blot研究联合靶向PI3K β和MLK3后对GBM的黏着斑及其他相关蛋白表达情况。最后运用裸鼠动物实验,观察联合靶向PI3K β和MLK3后肿瘤缩减情况。结果:AZD6482和URMC-099联用比单独用药更能显著抑制GBM细胞U-87 MG和U-118 MG的迁移和侵袭;单独应用AZD6482或URMC-099均能阻碍GBM细胞板状伪足和黏着斑的形成,且两药联用后细胞板状伪足和黏着斑的数目进一步降低;可以能通过降低Akt、ERK、ROCK2和Zyxin的磷酸化水平来阻断GBM细胞的板状伪足和黏着斑的形成;动物实验也表明AZD6482和URMC-099联用对裸鼠皮下GBM移植瘤的生长也有协同抑制作用。结论:本研究研究了联合用药策略治疗GBM的可能性,发现联合靶向PI3K β和MLK3对GBM细胞迁移和侵袭均有协同抑制作用,它能通过降低Akt、ERK、ROCK2和Zyxin的磷酸化水平来阻断GBM细胞的板状伪足和黏着斑的形成。而且,联合靶向PI3K β和MLK3对裸鼠皮下GBM移植瘤的生长也有协同抑制作用,但是动物体内应用PI3K β和MLK3抑制剂的剂量仍需要优化,且需要寻找另一个可穿透血脑屏障的PI3Kβ抑制剂来评价联合靶向PI3K β和MLK3对原位GBM移植瘤生长和浸润的抑制作用。