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目的:食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)是我国常见的消化道恶性肿瘤之一。近年来,许多学者对食管癌己经进行了大量开创性的研究。虽然对于食管癌已进行了很多干预措施,但是食管癌发病隐蔽,出现症状时已是中晚期。为降低食管癌的发病率和死亡率就要对其发病机制进行更进一步的研究。近年来以DNA甲基化为代表的表观遗传学改变已经成为研究肿瘤发病机制的一个热点而被广泛关注。本项研究通过研究WWOX、Smad4基因在食管癌及癌旁组织中的甲基化情况,探讨基因甲基化的发生和食管癌的发生,转移和分化程度之间的关系,从而为食管癌的发病机制,基因治疗及临床预后等方面提供新的理论和试验依据。方法1应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR, MSP)技术检测69例食管癌组织,48例癌旁组织中WWOX、Smad4基因的甲基化情况。2应用RT-PCR法检测44例癌组织和15例癌旁组织中WWOX、Smad4基因的mRNA表达情况。3运用统计软件SPSS13.0对数据进行统计学分析。结果1 WWOX基因甲基化发生率及其与临床病理学资料的关系WWOX基因在食管癌和癌旁组织中的甲基化发生率分别为26.1%(18/69)、4.2% (2/48),食管癌组织中WWOX基因甲基化发生率显著高于癌旁组(P<0.05);按TNM分期进行统计分析,Ⅲ/Ⅳ期食管癌患者中WWOX基因甲基化发生率(43.3% )高于Ⅰ/Ⅱ期患者(12.8% ),差异有统计学意义(p=0.004)。WWOX基因在小于60岁组的甲基化发生率28.1%高于大于等于60岁组的甲基化发生率24.3%(9/37),女性WWOX基因甲基化发生率31.3%大于男性甲基化发生率24.5%,有淋巴结转移组甲基化发生率35.5%大于无转移组的甲基化发生率18.4%,但均无显著统计学差异(P>0.05)。2 Smad4基因甲基化发生率及其与临床病理学资料的关系Smad4基因在69例食管癌患者的癌组织及48例癌旁组织中的甲基化率分别为2.9%(2/69)、8.3%(4/48),食管癌组织的甲基化发生率略低于癌旁组,但差异没有统计学意义(P>0.05)。3 WWOX、Smad4基因mRNA的表达情况WWOX mRNA在食管鳞癌组织、癌旁组织中的相对表达量分别为0.77±0.16,和0.89±0.12,癌组织中的表达量明显低于癌旁组织(P<0.05);Smad4mRNA在癌组织、癌旁组织中的相对表达量分别为0.75±0.17和0.88±0.14,癌组织中的表达量明显低于癌旁组织(P<0.05)。WWOX、Smad4的mRNA表达与组织分化程度﹑有无淋巴结转移﹑临床分期﹑年龄﹑性别之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。4癌组织中WWOX基因甲基化与mRNA表达之间的关系甲基化阳性食管鳞癌组织WWOX mRNA相对表达量(0.73±0.15),比甲基化阴性食管鳞癌组织mRNA相对表达量(0.76±0.17)低,但差异无统计学意义(P= 0.13)。结论1 WWOX基因在食管癌组织的甲基化发生率显著高于癌旁组织,提示WWOX基因甲基化可能参与食管癌的发生;Smad4基因在癌组织及癌旁组织中的甲基化发生率差异无统计学意义,提示Smad4基因甲基化可能与食管癌的发生无关。2按TNM分期WWOX在Ⅲ/Ⅳ期的甲基化率高于Ⅰ/Ⅱ期,提示WWOX基因可能参与了食管癌的进展。