随着社会经济的发展,大量新兴污染物出现,环境污染问题日益突出,由此也带来了一系列的健康风险,包括增塑剂、个人护理产品、农药和阻燃剂等在内的环境内分泌干扰物（Endocrine disrupting chemicals,EDCs）已被证实会导致雌性动物生殖能力下降。双酚A（Bisphenol A,BPA）作为典型的环境内分泌干扰物,常用于制造塑料制品。大量研究表明,BPA具有不可忽视的毒性和内分泌干扰作用,从而被多个国家限制使用,市面上因此出现了“BPA free”产品。而双酚F（Bisphenol F,BPF）是BPA生产和使用量最大的替代物之一,由于其独特的性质,BPF逐渐用于制造各种消费品。近年来,BPF在各种环境介质和动植物体内均有检出,表明其具有生物蓄积性。目前,BPF已经被证明具有多种毒性作用,但其对雌性动物生殖能力的影响仍未完全阐明,对减数分裂和后续胚胎发育的影响和机制研究也未见报道。因此,本研究以小鼠卵母细胞和受精卵为实验对象,使用免疫荧光和细胞活染技术,通过体外培养实验探究BPF对小鼠卵母细胞减数分裂成熟和早期胚胎发育的影响及其机制。本研究分为两个部分,结果如下:1.双酚F对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟的影响本研究通过在培养液中添加不同浓度的BPF（0、300、400、500μM）,体外培养处于生发泡（Germinal vesicle,GV）时期的小鼠卵母细胞,2 h后观察生发泡破裂（Germinal vesicle breakdown,GVBD）的情况,14 h后观察第一极体排放（Polar body extrusion,PBE）的情况。结果显示,300μM处理组卵母细胞GVBD率和PBE率显著下降,进一步研究发现,BPF处理导致纺锤体组装和染色体排列异常比例显著增加,且α-微管蛋白的乙酰化水平也显著上升,表明细胞骨架受到了损伤。同时,BPF处理会导致小鼠卵母细胞严重的氧化应激和DNA损伤,诱导早期凋亡,显著升高H3K27me3的表达水平。此外,本研究还比较了BPA和BPF对小鼠卵母细胞纺锤体形态、氧化应激和DNA损伤的影响,发现BPF造成纺锤体形态的损伤程度比BPA小,两者诱导相同强度的氧化应激,但BPF引起卵母细胞更严重的DNA损伤,说明BPF在卵母细胞成熟过程中的某些方面发挥了与BPA相似甚至更大的毒性作用,表明BPF不是BPA的安全替代物。2.双酚F对小鼠早期胚胎发育的影响本研究探究了BPF对小鼠植入前胚胎发育的影响。结果表明,与卵母细胞相比,较低浓度的BPF（50、75、100μM）处理便会抑制早期胚胎发育,只有50μM处理组有极少数的胚胎能发育到囊胚期,其余各处理组胚胎均阻滞在4-cell时期,表明胚胎对BPF毒性的耐受力比卵母细胞低。100μM BPF处理能导致2-cell率显著下降,诱导严重的DNA损伤,同时造成H3K27ac的表达水平显著下降,这可能是造成早期胚胎发育阻滞的重要原因。综上所述,本研究表明BPF会抑制小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟和早期胚胎发育,表现为第一极体排放率和囊胚率显著降低。BPF可以通过破坏卵母细胞细胞骨架结构,诱导氧化应激和DNA损伤,导致早期凋亡,改变表观遗传修饰,进而损害卵母细胞质量。BPF能通过诱导DNA损伤和改变表观遗传修饰损害早期胚胎质量,表明BPF不是BPA的安全替代物。