Plectasin是2005年Mygind等从生长在北欧松树林的腐生子囊菌（the saprophytic ascomycete Pseudoplectania nigrella）中分离出来的首例真菌防御素类抗菌肽。Plectasin对革兰氏阳性菌有明显的抗菌活性,尤其是肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌,其中还包括一些对常规抗生素有抗性的菌株。Plectasin在体外的杀菌速度相当快,与万古霉素和青霉素相当,并且不易产生耐药性,与传统使用的抗生素之间不存在交叉抗性。同时Plectasin对哺乳动物细胞没有毒害作用,而且能够透过血脑屏障,在脑脊液中的渗透能力高达33%,明显高于其它常规抗生素。因此,Plectasin非常有望成为一种新型的抗菌药物,在包括中枢神经系统感染在内的细菌感染性疾病的治疗中有着非常好的临床应用潜力。本论文重点对Plectasin在大肠杆菌中的融合表达、分离纯化及其抑菌活性的鉴定进行了研究。我们从NCBI GenBank中检索获得Plectasin成熟肽的氨基酸序列,依据大肠杆菌密码子偏好性对其进行优化,设计出适用于大肠杆菌表达的4条引物,采用修改的SOE法进行PCR扩增来获得Plectasin基因的完全序列,再分别对目的基因和pET32a载体进行双酶切和连接反应,构建重组质粒。将重组质粒转入大肠杆菌BL21中,利用IPTG进行诱导表达,确定出最佳诱导条件。然后采用镍柱亲和层析分离纯化重组融合蛋白,利用Xa因子切去融合蛋白获得纯化的Plectasin目的蛋白。采用琼脂孔穴扩散实验验证Plectasin的抑菌活性。本论文研究结果表明：我们成功构建了重组质粒pET32a-PLEC;重组Plectasin在大肠杆菌中实现了高效可溶性表达,表达量高达89%；确定了IPTG最佳诱导时间为3h,最佳诱导终浓度为0.8mmol/L;采用镍柱亲和层析成功的对重组融合蛋白Trx-plec进行了分离纯化,纯化效率达到97%；利用Xa因子切割融合蛋白可释放获得纯化的Plectasin目的蛋白,抑菌实验证明了重组Plectasin对金黄色葡萄球菌（G+）有较强的抑菌活性。本实验为Plectasin的进一步深入研究及大量生产奠定了一定的基础,为新型抗菌药物在临床应用中的研究提供了理论依据。