噬血细胞性淋巴组织细胞增生症患者血浆microRNA的表达及其意义

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目的:本研究通过筛选噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(Hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH)患者血浆中差异性miRNA表达谱,寻找与HLH疾病发生相关的miRNA,并分析其表达水平与临床实验室指标的相关性,初步探讨异常表达的miRNA在HLH发病机制中的作用。方法:收集2017年1月~2019年2月在南昌大学第一附属医院血液科首次确诊的28例HLH患者的血浆,所有患者均符合HLH-2004指南的诊断标准。同期收集15例健康体检者的血浆,性别和年龄与HLH患者匹配。应用基因芯片技术检测并筛选HLH患者血浆中差异性表达的miRNA,并采用荧光定量PCR检测血浆中miR-125a-3p和miR-320a的表达水平。运用SPSS软件分析miR-125a-3p和miR-320a表达水平与临床指标的相关性,受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估miR-125a-3p和miR-320a对HLH的诊断价值。结果:1、28例HLH患者均表现为发热、脾大及血清铁蛋白升高,64.29%的患者存在噬血现象,全血细胞减少的患者占96.43%,仅有35.71%的患者表现为低纤维蛋白原血症,sCD25升高的患者约82.14%。HLH患者的年龄和性别与对照组无差异(P=0.399)。2、基因芯片筛查结果显示,在HLH患者血浆中共筛选出差异性表达的miRNA有24个,与正常人比较,有20个miRNA的表达显著上调,4个miRNA的表达显著下调。3、HLH患者和对照组血浆中miR-125a-3p的表达水平分别为7.21±1.48和1.53±0.34,与正常人相比,HLH患者血浆中miR-125a-3p的表达上调,差异有显著的统计学意义(P(27)0.001);miR-320a在HLH患者血浆中的表达水平较正常人明显上调,差异有统计学意义(5.83±1.59和1.33±0.31,P(27)0.001)。4、血浆miR-125a-3p的表达水平与HLH患者的临床资料相关性分析显示,miR-125a-3p的表达与患者的性别、年龄、噬血现象、Fbg及sCD25等指标无显著相关性。miR-125a-3p的表达与实验室指标WBC和ANC呈负相关,相关系数分别为(r(28)-0.463,p=0.013)和(r(28)-0.435,p=0.021)。血浆miR-320a的表达水平与LDH(r(28)0.531,p(28)0.004)和SCr(r(28)0.623,p=0.0004)呈正相关,miR-320a的表达与性别、年龄、噬血现象、Fbg及sCD25等指标无相关性。5、ROC曲线分析显示,miR-125a-3p和miR-320a运用于HLH的诊断时,其曲线下面积(AUC)分别为0.783和0.719,敏感性分别为78.6%和53.6%,特异性分别为66.7%和93.3%,最佳临界值分别为1.61和3.03。结论:1、HLH患者血浆中存在特异性的miRNA表达谱,为HLH的发病及诊断提供了新靶点。2、血浆miR-125a-3p和miR-320a在HLH患者中的表达明显上调,提示miR-125a-3p和miR-320a可能与HLH的发病密切相关。3、血浆miR-125a-3p的表达上调与HLH患者的WBC和ANC数量相关性明显,提示miR-125a-3p可能参与了HLH细胞因子的产生及免疫细胞的活化;miR-320a表达上调越明显,HLH患者肝、肾功能损害的程度越高,表明miR-320a促进炎症反应。4、miR-125a-3p和miR-320a可能是诊断HLH的潜在生物标志物。
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