基于纳米无限配位聚合物的生物传感分析

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疾病标志物在各类疾病的预防、诊断、治疗以及愈后监测中发挥着极其重要的指导作用。近年来,科研工作者致力于研发用于疾病标志物的快速、灵敏、高效的检测方法。在众多的检测方法中酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),由于其特异性好,灵敏度高等优点备受推崇。但是传统的ELISA也存在很多问题,酶活性的部分或完全丧失、繁琐的构建过程、单一的信号输出模式,酶负载量低,对检测环境条件要求苛刻等。而新型功能化纳米材料的引入为解决以上问题提供了新的思路。无限配位聚合物(infinite coordinate polymer,ICP)纳米颗粒,是一种新兴纳米材料,它是由金属主体和有机桥配体配位构成,一经发现便在科研界引发了轰动。与配位聚合物的其他成员相比(如金属有机框架材料),ICP表现出结构可控和客体自适应封装的能力,易于功能化来适应多变的检测需求,更重要的是对外部刺激的快速响应能力,可以广泛应用于现场分析领域。1.利用光解法合成了铁离子为主体的无限配位聚合物纳米颗粒(FeICP),并首次发现了FeICP具有类过氧化物酶性质。将FeICP与识别单元二抗(Ab2)结合制成纳米信标,FeICP纳米信标能够催化H2O2产生羟基自由基(OH?),OH?能够氧化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)产生氧化态的TMB(TMBOX),检测体系溶液由无色变为蓝色。同时TMBOX在808 nm处有强的光吸收能力,利用808 nm的激光对反应后的溶液进行辐照,溶液会有明显的升温现象。构建用于心机肌钙蛋白检测的三明治夹心型生物传感器,利用酶标仪和数字温度计就能够实现比色和光热的双模态信号读取,对心机肌钙蛋白进行灵敏检测。2.基于操作简单、灵敏度高,抗干扰性强,对仪器设备要求低的检测诉求,开发了一种新型的用于谷胱甘肽(glutathione,GSH)的比色和光热的双模态检测方法。利用FeICP的类氧化物酶性质,催化TMB成为氧化态TMB(TMBOX)显蓝色,而TMBOX能够与谷胱甘肽发生氧化还原反应,比色强度与GSH的浓度成反比。TMBOX在808 nm处有强的光吸收,用808 nm的激光进行短暂辐照后,溶液迅速升温((35)T),(35)T与GSH的浓度呈反比。这样便实现了对GSH的比色和光热的双模态灵敏检测。3.利用FeICP的自适应封装能力,对FeICP进行了高效的钼离子掺杂,提高了FeICP的类过氧化物酶性质。将制得的Mo@FeICP纳米颗粒与识别单元二抗(Ab2)结合得到纳米信标(Mo@FeICP-Ab2),Mo@FeICP-Ab2能够特异性的识别待测物,当外源的加入H2O2和对苯二胺(OPD)时,FeICP能够催化OPD-H2O2的体系产生2,3-二氨基酚嗪(OPDox),使溶液由无色变为黄色,于此同时OPDox能够产生强烈的荧光。基于以上原理我们成功开发了一种基于Mo@FeICP的比色和荧光双模态精准检测前列腺癌特异性抗原的新方法。
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