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目的:本研究建立在大鼠皮层原代神经元氧糖剥夺损伤(Oxygen-glucose deprivation,OGD)模型的基础之上,通过加入外源性IL-10,来观察IL-10对大鼠皮层神经元缺氧缺糖后神经细胞凋亡、突起再生情况及核转录因子NF-κB(nuclear factor kappa B)、神经凋亡抑制蛋白NAIP(neuronal apoptosis inhibitor protein)、突触后致密蛋白PSD-95(postsynaptic density protein 95)表达的影响。为IL-10治疗缺血性脑血管病提供理论依据。方法:1、将大鼠的皮层神经元行体外分离培养与鉴定。2、将培养至5d的原代皮层神经元行氧糖剥夺培养90min后,建立了OGD模型;48小时后再用光镜与激光共聚焦显微镜观察OGD后神经元损伤情况。3、根据是否在大鼠皮层原代神经元OGD模型中加入外源性IL-10或NF-κB特异性阻断剂PDTC(吡咯烷二硫代氨基甲酸酯),将实验随机分为四个组:正常对照组(Control组)、OGD模型组(OGD组)、双药物干预组(OGD+IL-10+PDTC组)、IL-10组(OGD+IL-10组)。4、各组OGD损伤后24或48小时进行随后的检测:Annexin-v/PI染色后流式细胞仪检测原代神经元凋亡;western blot检测NF-κB、NAIP、PSD-95蛋白的表达量;免疫荧光染色,ZEISS LSM 710激光共聚焦显微镜拍照,ZEN2009软件分析测量各组神经元最长突起的平均长度。结果:1、Western blot结果示:用Western blot技术检测各分组NF-κB蛋白的表达情况,结果表明,OGD组与正常组比较,NF-κB蛋白的表达增多(p<0.05);OGD+IL-10组的NF-κB表达量较OGD组相比升高(p<0.05);OGD+IL-10+PDTC与OGD+IL-10组相比较,NF-κB蛋白表达降低(p<0.01)。各分组的NAIP蛋白表达情况显示,OGD组与正常组比较,NAIP蛋白的表达明显减少(p<0.01);OGD+IL-10组与OGD组相比较,NAIP蛋白表达增高(p<0.05);OGD+IL-10+PDTC组与OGD+IL-10组相比较(p<0.01)。各组PSD-95蛋白表达情况,OGD组与正常组比较,PSD-95蛋白表达明显减少(p<0.01);OGD+IL-10组与OGD组相比较,PSD-95蛋白表达增高(p<0.01);OGD+IL-10+PDTC组与OGD+IL-10组相比较,PSD-95蛋白表达减少(p<0.01)。2、流式细胞仪技术检测神经元凋亡结果示:OGD组平均细胞凋亡数较正常组明显增多(21.333±0.788 vs.6.767±0.185,p<0.01);OGD+IL-10组的平均细胞凋亡数较OGD组明显减少(12.000±0.650 vs.21.333±0.78,p<0.01);OGD+IL-10+PDTC组的平均细胞凋亡数较OGD+IL-10组增多(21.167±2.974 vs.12.000±0.650,p<0.05)。3、免疫荧光染色测量神经元细胞最长突起的平均长度结果示:OGD组细胞的最长突起平均长度较正常组明显缩短(74.160±3.967 vs.130.632±3.563,p<0.01);OGD+IL-10组细胞的最长突起平均长度较OGD组明显增加(94.066±7.449 vs.74.160±3.967,p<0.01);OGD+IL-10+PDTC组的细胞最长突起平均长度较OGD+IL-10组缩短(73.126±4.066 vs.94.066±7.449,p<0.01)。结论:而IL-10可减少缺氧缺糖损伤(OGD)后的神经元凋亡及促进神经突起再生,其机制可能是通过激活NF-κB及下游的NAIP、PSD-95发挥作用。