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研究背景和目的:胃癌是全球第五大最常见的恶性肿瘤,也是癌症死亡的第三大原因。在胃癌治疗中,化疗仍是非常重要的疗法,但多药耐药(MDR)现象的产生常致使化疗失败。MDR的发展通常由一种或多种能量依赖性转运蛋白介导,这种转运蛋白从细胞中检测并排出抗癌药物。这些转运体包括P糖蛋白(P-gp/MDR1),多药耐药相关蛋白1(MRP1),肺癌耐药蛋白(LRP),和乳腺癌耐药蛋白(BCRP)。除此之外,其他的机制也参与了肿瘤获得性耐药的发展,包括对药物诱导凋亡的不敏感性。其中抗凋亡蛋白分子如Bcl-2/Bcl-x L的表达增加,则抑制促凋亡蛋白Bax/Bak复合物的形成。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor related apoptosis incucing ligand,TRAIL)是一个能高度选择性诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无损害的肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员之一。TRAIL可以提高化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用,同时TRAIL对肿瘤耐药细胞也有较强的致凋亡作用并可以将肿瘤耐药细胞株逆转为敏感细胞株。研究表明,降低肿瘤细胞MDR1、MRP1表达,以及上调Bax/Bcl-2的比率,可提高肿瘤对化疗药物的敏感性,但TRAIL可否通过影响MDR1,MRP1和Bax/Bcl-2基因的表达而增加肿瘤对化疗药物的敏感性尚不明确。本研究中,拟观察MDR1、MRP1、Bcl-2、Bax基因在人胃腺癌耐阿霉素细胞株SGC7901/ADR与亲本细胞株SGC7901间表达的差异,和在加入TRAIL后,TRAIL对SGC7901/ADR细胞中MDR1/P-gp,MRP1,Bcl-2和Bax表达的影响,旨在研究并探讨参与胃癌继发性耐药的可能基因以及TRAIL杀伤肿瘤耐药细胞及增加化疗药物敏感性的可能机制,为胃癌化疗寻找新的方向。方法:1.MTT法检测SGC7901/ADR和其亲本细胞SGC7901的药物敏感性。2.实时荧光定量PCR检测SGC7901/ADR和SGC7901细胞MDR1,MRP1,Bcl-2,Bax m RNA表达。3.不同浓度TRAIL(10、50、100ng/ml)处理SGC7901/ADR细胞后,使用实时荧光定量PCR法和蛋白印迹法检测MDR1,MRP1,Bcl-2,Bax m RNA和蛋白的表达。结果:1.药物敏感实验显示与亲本细胞SGC7901相比,长春新碱,阿霉素对SGC7901/ADR细胞的IC50明显提高(均P<0.05),顺铂对SGC7901/ADR细胞的IC50轻度提高(P<0.05)。2.实时荧光定量PCR显示SGC7901/ADR细胞中MDR1,MRP1,Bcl-2的m RNA表达与亲本细胞SGC7901相比明显上升,Bax m RNA表达降低(all P<0.01)。3.TRAIL处理细胞后,下调了胃癌耐药细胞株SGC7901/ADR的MDR1,MRP1,Bcl-2m RNA和蛋白的表达,提高了Bax的m RNA表达,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1 MDR1、MRP1以及Bcl-2的高表达以及Bax的低表达可能参与胃癌耐药细胞株SGC7901/ADR的继发性耐药。2在SGC7907/ADR细胞中,TRAIL可能通过下调MDR1、MRP1、Bcl-2和上调Bax的表达,增加了对肿瘤耐药细胞的致凋亡,进而部分逆转胃癌的多药耐药。