壳寡糖、氨基葡萄糖对酒精性肝损伤小鼠的保护作用研究

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酒精性肝病是由于长期大量的饮酒,导致肝脏清除氧自由基的能力下降,脂质氧化代谢紊乱,造成肝脏内脂肪沉积;同时,酒精在肝脏内转化成乙醛,乙醛的毒副作用对肝脏的损伤也很大。酒精性肝损伤可分为酒精性脂肪肝,酒精性肝炎和酒精性肝硬化三大类,其中酒精性脂肪肝是最主要、最初期的发病方式。当肝细胞内脂质蓄积超过肝湿重的5%,或组织学上每单位面积见1/3以上肝细胞脂变时,称为脂肪肝。随着人们生活水平的提高和生活方式的改变,酗酒者不断增多,导致酒精性脂肪肝有迅速增加的趋势。酒精性脂肪肝对人体健康的危害越来越受到社会的广泛重视。壳聚糖作为自然界中多糖生物合成第二大再生资源,近20年来已引起世界许多国家的关注并在生物医药,功能食品,日用化工,环境保护等诸多领域中得到广泛的研究和开发应用。甲壳素经降解和脱乙酰化而制得的小分子壳寡糖(COS)和氨基葡萄糖(Glu-NH2),由于其分子量小,水溶性好,易被机体吸收,无毒性且具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、增强机体免疫等功能。已应用于功能食品,动物抗病饲料添加剂,农作物抗病剂及增产剂等行业。有关壳寡糖和氨基葡萄糖用于酒精性肝损伤的保护方面的研究,除壳寡糖对于CCl4导致的小鼠急性肝损伤的保护作用有少量文章报道外,氨基葡萄糖在国内外尚未见详细报道。本实验制备和纯化出低分子量的壳寡糖和氨基葡萄糖,并对其理化性质指标进行了测定。通过体内实验研究了COS和GLc-NH2对酒精性肝损伤小鼠的保护作用。以昆明种小鼠为研究对象,建立急性酒精中毒模型和酒精性肝损伤模型,并用不同剂量的壳寡糖和氨基葡萄糖进行连续灌胃8周。眼球取血,对小鼠的血液指标进行测定,主要包括丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),γ一谷氨酞基转移酶(GGT),甘油三酯(TG)总胆固醇(TC);处死取肝脏固定,做组织切片,观察分析组织受损情况。体内实验结果表明:通过急性酒精中毒实验发现GLc-NH2、COS对急性酒精中毒小鼠具有明显的保护作用,能很大程度缩短小鼠的醒酒时间,减少小鼠的死亡率。酒精性肝损伤的模型组ALT、AST和GGT的活性和TG、TC含量均显著升高,与空白对照组有极显著性差异(P<0.01)。组织学观察肝脏细胞有大量的Mallory小体并聚集成灶,肝中有明显的小泡性脂变,证明造摸成功。给小鼠灌服不同剂量的GLc-NH2和COS,能显著降低血清中ALT、AST和GGT的活性和TG、TC含量,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),与空白组差异不明显;组织学观察表明各剂量组小鼠的肝脏受损程度有明显的改善,少见Mallory小体和小泡性脂变。本实验结果表明:GLc-NH2和COS对急性酒精中毒和慢性的酒精性肝损伤都有明显的保护作用,为进一步研究壳寡糖和氨基葡萄糖的解酒和酒精性肝病的治疗提供了一定的实验依据。
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