背景和目的:结直肠癌（Colorectal Cancer,CRC）是全球常见的肿瘤类型,其死亡率居高不下。经过30多年的临床研究,5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）仍被推荐为治疗CRC的首选药物。虽然基于5-FU的化疗有利于结肠癌患者,但肿瘤耐药性的产生仍是导致肿瘤复发和转移的主要原因,极大地限制了化疗有效性的提高,影响患者预后。因此,为临床逆转化疗耐药,提高结肠癌对5-FU化疗的敏感性提供新的靶点和思路,对提高结肠癌患者生存质量具有非常重要的意义。已有研究表明,在多种类型的恶性肿瘤细胞和组织中,如肝癌,乳腺癌,前列腺癌等,均发现硬脂酰辅酶A去饱和酶1（Stearoyl Co A desaturase1,SCD1）表达水平的升高且伴有单不饱和脂肪酸（Monounsaturated Fatty Acid,MUFA）浓度的增加。其表达水平或活性的变化可能与肿瘤的发病机制,发病率和死亡风险有关。抑制SCD1已被发现能有效地抑制肿瘤细胞增殖并诱导肿瘤细胞凋亡,SCD1被认为是治疗广谱肿瘤的一种新的分子靶点。还有文献报道,对索拉非尼耐药的肝癌细胞中SCD1表达水平增高。敲低SCD1后,肝癌细胞的存活率降低,对索拉非尼和阿霉素的抵抗性降低。SCD1部分介导乳腺癌细胞的耐药,并与乳腺癌患者的不良预后有关。但目前SCD1在结肠癌细胞5-FU耐药中的作用尚不明确。我们推测SCD1可能影响结肠癌细胞对5-FU的敏感性。因此,本课题拟通过建立结肠癌耐药细胞株,研究结肠癌临床标本脂质代谢变化,并上调结肠癌细胞内SCD1的表达,进一步通过体外细胞及生化实验和体内动物实验,探索SCD1在结肠癌细胞5-FU耐药中的作用。材料及方法:1.通过对结肠癌HCT116细胞进行5-FU浓度间歇性递增与高浓度反复诱导筛选的方法,建立较稳定的结肠癌5-FU耐药细胞株模型,命名为HCT116/5FU细胞。CCK-8实验比较HCT116和HCT116/5FU的细胞存活率及IC50;2.通过油红O染色研究结肠癌临床标本中的脂质含量,通过脂质组学及免疫组化（Immunohistochemical Staining,IHC）等实验研究SCD1的表达与结肠癌耐药的关系;3.利用结肠癌细胞株HCT116,结合慢病毒转染的方法,进行q-PCR、CCK-8、克隆形成、流式细胞仪检测结肠癌细胞凋亡率及Western blot实验验证SCD1的表达对结肠癌5-FU耐药的影响;4.裸鼠皮下成瘤结合5-FU治疗,监测肿瘤的形成以及裸鼠体重的变化,进一步验证SCD1对结肠癌5-FU耐药的影响;5.通过Seahorse XF棕榈酸酯氧化压力测试实验探究结肠癌细胞的脂肪酸氧化水平。结果1.成功建立结肠癌5-FU耐药细胞株HCT116/5FU。5-FU处理后,HCT116/5FU细胞的存活率及IC50明显高于HCT116细胞。2.耐药结肠癌标本中脂质多于普通结肠癌标本。在耐药结肠癌细胞的脂质代谢相关酶中SCD1表达水平明显升高。SCD1的表达水平与结肠癌患者总生存期（Overall Survial,OS）负相关。在耐药结肠癌组织标本及HCT116/5FU中SCD1的表达明显升高。3.成功构建HCT116-OE-SCD1细胞模型。在5-FU处理后,HCT116-OE-SCD1细胞的存活率升高,克隆形成能力增强,凋亡率下降,凋亡相关蛋白表达减低,DNA损伤减少。4.在5-FU治疗的同时,SCD1过表达组裸鼠成瘤的最终重量、最终体积和增加的速率更高,而裸鼠的最终体重更小。5.在5-FU处理后,HCT116-OE-SCD1组细胞脂肪酸氧化（Fatty Acid Oxidation,FAO）水平高于HCT116-Control组细胞。结论1.耐药结肠癌组织内脂质含量高于普通结肠癌组织。2.SCD1的表达水平与结肠癌患者OS负相关,耐药结肠癌组织标本及HCT116/5FU中SCD1的表达明显升高。3.上调SCD1促进结肠癌细胞对5-FU的抵抗,减少其在5-FU处理后的凋亡及DNA损伤。4.上调SCD1促进裸鼠皮下结肠癌对5-FU的抵抗。5.SCD1可以增加结肠癌细胞在5-FU应激下的FAO水平。