【摘 要】
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本论文采用微生物发酵法对裸燕麦中的蛋白进行生物降解制备具有ACE抑制活性的燕麦短肽和具有抗氧化活性的燕麦多肽。并采用响应面法对其工艺条件进行了优化;利用凝胶过滤层析
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本论文采用微生物发酵法对裸燕麦中的蛋白进行生物降解制备具有ACE抑制活性的燕麦短肽和具有抗氧化活性的燕麦多肽。并采用响应面法对其工艺条件进行了优化;利用凝胶过滤层析、离子交换层析和半制备RP-HPLC对得到的发酵液进行分离纯化。研究结果如下:1.对液态发酵的工艺条件进行了优化,以肽得率和ACE抑制率为指标通过单因素试验得到液态发酵的发酵条件,再以响应面法分析,优化了枯草芽孢杆菌液态发酵的工艺条件,确定枯草芽孢杆菌液态发酵生产燕麦ACE抑制肽的最佳工艺条件分别为发酵时间39h、发酵温度34℃、初始pH值为9.0,在此条件下ACE抑制率可达64.05%。2.采用枯草芽孢杆菌对裸燕麦进行发酵制备燕麦抗氧化肽,DPPH·自由基清除率为考察指标,在单因素设计的基础上,应用响应面分析法,优化了液态发酵的工艺条件,得出最优发酵工艺条件为:发酵时间44h、发酵温度37℃,接种量5%,在此条件下DPPH·自由基清除率可达63.59%。3.将发酵得到的燕麦多肽液进行微孔滤膜分离,凝胶色谱分离,离子交换色谱分离和反相高效液相色谱分离,结果表明:发酵液经过凝胶过滤色谱分离后,得到3个主要峰,其中第二个峰的ACE抑制活性最高为65.54%,将经过凝胶层析分离的产物用732强酸型阳离子交换柱,收集20个组分,其中组分11、12、13的ACE抑制活性最高,为68.39%。将上述处理的发酵液经过半制备型RP-HPLC分离后得到纯度较高的ACE抑制肽,其ACE抑制活性高达70.12%。
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