【摘 要】
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目的:通过观察针刺肺俞配定喘、孔最配鱼际对哮喘大鼠的气道阻力(RL)和肺顺应性(Cdyn)的影响,肺组织气道形态学及病理学的改变,肺组织TGF-β1、Smad3 m RNA和蛋白表达的变化,从分子水平揭示针刺抗哮喘气道重塑的疗效机制,为针灸治疗哮喘提供科学依据。方法:随机将50只SPF级雄性SD大鼠分为正常(NC)组、模型(AS)组、针刺肺俞配定喘(AAF)组、针刺孔最配鱼际(AAK)组、假针刺(
【基金项目】
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广西中医药大学2021年研究生教育创新计划项目(项目编号:YCXJ2021023);
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目的:通过观察针刺肺俞配定喘、孔最配鱼际对哮喘大鼠的气道阻力(RL)和肺顺应性(Cdyn)的影响,肺组织气道形态学及病理学的改变,肺组织TGF-β1、Smad3 m RNA和蛋白表达的变化,从分子水平揭示针刺抗哮喘气道重塑的疗效机制,为针灸治疗哮喘提供科学依据。方法:随机将50只SPF级雄性SD大鼠分为正常(NC)组、模型(AS)组、针刺肺俞配定喘(AAF)组、针刺孔最配鱼际(AAK)组、假针刺(AAJ)组,每组10只;除正常组外均采用OVA致敏激发制成哮喘大鼠模型,正常组用生理盐水代替;采用An IRes动物肺功能分析系统测定实验动物RL和Cdyn值,Masson、HE染色观察肺组织气道形态学及病理学改变,q RT-PCR检测TGF-β1、Smad3 m RNA的表达,Western blot检测TGF-β1、Smad3蛋白的水平。结果:(1)RL及Cdyn值的变化:与正常组比较,模型组和AAJ组大鼠四次RL值增加,Cdyn值降低,均有统计学意义;与模型组比较,AAF组和AAK组四次RL值降低,Cdyn值上调,均有统计学意义;与AAJ组比较,AAF组四次RL值降低、前三次Cdyn值升高,而AAK组后三次RL值降低、第2及第4次Cdyn值升高,均有统计学差异;模型组与AAJ组组间、AAF组与AAK组组间比较,四次RL、Cdyn值均无统计学差异。(2)病理学及气道形态学改变:正常组肺组织无异常改变,模型组和AAJ组均有支气管管腔狭窄、上皮大量杯状细胞增生、周围大量炎症细胞浸润、大量胶原纤维增生及平滑肌明显增厚等改变,模型组见淋巴细胞浸润至粘膜层、部分肺泡萎缩塌陷、肺实质化等,AAJ组部分肺泡壁增厚;AAF组和AAK组无管腔狭窄、淋巴细胞浸润、肺泡壁增厚等改变,上皮杯状细胞增生减少,炎症程度明显减轻,胶原纤维增生及平滑肌增厚明显降低,且AAF组疗效更突出。(3)TGF-β1和Smad3 m RNA的表达:与正常组比较,模型组、AAJ组和AAK组TGF-β1、Smad3 m RNA表达升高,均有统计学意义,AAF组无统计学差异;与模型组比较,AAF组和AAK组表达下调,均有统计学意义,AAJ组表达无统计学差异;与AAF组比较,AAK组表达升高,有统计学意义。(4)TGF-β1和Smad3蛋白的表达:与正常组比较,模型组、AAJ组、AAF组和AAK组TGF-β1、Smad3蛋白表达升高;与模型组和AAJ组比较,AAF组和AAK组表达下降;以上均有统计学意义;模型组与AAJ组组间、AAF组与AAK组组间比较表达量均一致。结论:针刺肺俞配定喘和孔最配鱼际可有效减轻哮喘大鼠肺部炎症,抑制在炎性刺激下所致的胶原纤维增生和气道平滑肌增厚等异常结构改变,阻止哮喘气道重塑,降低气道阻力,增加肺顺应性,改善肺功能;其作用机制可能是通过调控TGF-β1/Smad3信号通路,抑制上游因子TGF-β1的表达,降低Smad3的分泌,干预该通路的异常激活,抑制气道结构异常改变,达到防治哮喘气道重塑的目的。尽管本实验中针刺肺俞配定喘比孔最配鱼际在改善哮喘气道重塑方面疗效更好,但对此结果我们认为还有待进一步研究。
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