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背景和目的:泛素-蛋白酶体途径是调控细胞内蛋白质降解的重要途径,涉及细胞周期调控、信号通路的转导、细胞DNA修复、炎症反应及肿瘤发展等多个方面。去泛素化酶可逆向调控该途径。饰胶蛋白聚糖(decorin,DCN)是细胞外基质一种成分,能够抑制肿瘤细胞生长、逆转肿瘤细胞表型、抑制肿瘤血管生成。DCN主要通过泛素-蛋白酶体途径进行降解。卵巢肿瘤相关蛋白酶B1(OTU domain-containing ubiquitin aldehyde-binding protein B1,OTUB1)属于去泛素化酶家族的成员,既可以抑制蛋白的泛素化,也可以促进泛素化过程。本研究旨在探讨OTUB1在结肠组织中的表达,并进一步探讨OTUB1与DCN之间的表达趋向。方法:收集结肠癌、腺瘤、正常粘膜组织,采用免疫组织化学法检测OTUB1在结肠组织的表达。应用RT-PCR检测结肠癌组织中DCN的m RNA表达。选定稳定转染OTUB1的结肠癌细胞系lovo和转染空载质粒结肠癌细胞系lovo(对照组)作为研究对象,采用实时荧光定量PCR(Real time quantitative PCR,real time qPCR)和Western blotting,在m RNA和蛋白水平上检测OTUB1与DCN的表达。结果:(1)免疫组化:OTUB1在结肠癌组织中的表达明显高于正常粘膜组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)RT-PCR结果显示结肠癌组织中扩增出的295bp目的DCN条带明显增亮,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)实时荧光定量PCR:转染OTUB1的结肠癌细胞OTUB1与DCN的m RNA表达水平均上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)Western-blot:与对照组lovo细胞相比较,稳定转染OTUB1的lovo细胞中OTUB1与DCN蛋白均有明显表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:OTUB1蛋白在正常结肠粘膜、腺瘤、结肠癌组织中的表达呈递增趋势,OTUB1的过表达抑制了DCN的泛素化降解。