【摘 要】
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目的:为明确TM4SF1在胰腺癌转移过程中的分子机制,我们进行了本次研究,检测在PANC-1和AsPC-1中,TM4SF1通过调节DDR1促进胰腺癌细胞迁移与侵袭。方法:在PANC-1及AsPC-1细胞中,
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目的:为明确TM4SF1在胰腺癌转移过程中的分子机制,我们进行了本次研究,检测在PANC-1和AsPC-1中,TM4SF1通过调节DDR1促进胰腺癌细胞迁移与侵袭。方法:在PANC-1及AsPC-1细胞中,利用双重免疫荧光技术、免疫共沉淀技术检测TM4SF1和DDR1相互关系。下调TM4SF1表达,通过qRT-PCR和Western Blot检测DDR1表达水平。过表达DDR1后,检测胰腺癌细胞迁移、侵袭以及MMP2、MMP9蛋白表达水平的变化情况。利用siTM4SF1和DDR1表达质粒验证过表达DDR1后是否可恢复由于TM4SF1表达下调对癌细胞迁移、侵袭以及MMP2、MMP9蛋白表达水平的影响。结果:在PANC-1和AsPC-1中,绿色荧光标记的DDR1和红色荧光标记的TM4SF1共定位于细胞膜。并且,免疫共沉淀检测TM4SF1和DDR1存在相互关系。下调TM4SF1表达后,DDR1 mRNA和蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。根据Transwell和Western Blot实验结果显示过表达DDR1后,胰腺癌细胞迁移和侵袭数目显著增加,MMP2和MMP9蛋白表达水平升高(P<0.05)。将siRNA和真核表达质粒分别转染至细胞后发现,过表达DDR1后可恢复由于TM4SF1表达下调对癌细胞迁移、侵袭以及MMP2和MMP9蛋白表达水平的改变。结论:在胰腺癌细胞中,TM4SF1与DDR1之间存在相互作用,并且通过调节MMP2和MMP9表达促进胰腺癌细胞迁移及侵袭。
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