莪术醇提物对PC12细胞和HUVECs的保护作用及其机制研究

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目的:研究莪术醇提物对PC12细胞和HUVECs的保护作用及其机制研究,为莪术的临床应用提供药理学依据。方法:1.检测莪术醇提物各部位对缺氧后PC12细胞的影响将PC12细胞分为:对照组、模型组、尼莫地平组、药物高、中、低浓度组。采用MTT比色法检测莪术醇提物各部位对缺氧后PC12细胞活力的影响;采用ELISA检测莪术醇提物各部位对缺氧后PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)水平、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。2.检测莪术醇提物正丁醇部位对缺氧后HUVECs的影响将内皮细胞分为:对照组、模型组、尼莫地平组、药物高、中、低浓度组。采用MTT比色法检测莪术醇提物正丁醇部位对缺氧后HUVECs活力的影响;采用ELISA检测莪术醇提物正丁醇部位对缺氧后HUVECs LDH水平、MDA含量和SOD活性的影响;采用Transwell法检测莪术醇提物正丁醇部位对缺氧后HUVECs迁移能力的变化;采用Matrigel法检测莪术醇提物正丁醇部位对缺氧后HUVECs管腔形成能力的变化;采用Western blot分别检测莪术醇提物正丁醇部位对缺氧后HUVECs血管内皮生长因子(VEGF)和缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)蛋白表达的影响。结果:1.与缺氧模型组相比,莪术醇提物各部位高、中、低浓度组PC12细胞抑制率、LDH漏出、MDA含量和SOD活性均无明显改变,差异均无统计学意义(P >0.05)。2.与缺氧模型组相比,莪术醇提物正丁醇部位高、中、低浓度组HUVECs抑制率、LDH漏出、MDA含量显著降低,SOD活性、穿膜细胞数、VEGF和HIF-1α表达量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与缺氧模型组相比,莪术醇提物正丁醇部位高、中、低浓度组均形成了较为完整的管腔样结构。结论:莪术醇提物各部位不能减轻缺氧后PC12细胞的损伤,而莪术醇提物正丁醇部位对缺氧后HUVECs具有保护作用。提示莪术对缺血性脑卒中具有保护作用,可能主要不是作用于神经细胞,而是对血管内皮细胞有保护作用,其机制可能是通过增加VEGF和HIF-1α的表达来增加血管内皮新生。
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