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目的：研究不同剂量的低分子量肝素(LOW molecular weight heparin，LNWH)对妊娠期高血压疾病(Hypertensive disorder complicating pregnancy，HDCP)大鼠血清一氧化氮(Nitric Oxide，NO)水平、内皮细胞型一氧化氮合成酶(Endotheli cellNOS，eNOS)在子宫及胎盘中的表达及血清白细胞介素6(Interleukin-6，IL-6)水平的影响，探讨LMWH治疗HDCP时保护血管内皮细胞及调节免疫的作用机制，以指导临床的药物治疗。
方法：将60只大鼠随机分为六组：A、HDCP模型组(n=12)：孕10天起鼠尾静脉缓慢注射内毒素(LPS)2.0 μg/Kg，隔日一次至分娩，共六次；B、单用硫酸镁(MS)治疗组(n=12)：造模后自孕14天起肌肉注射MS 80rag/Kg，每6小时1次至分娩，共八天； C、低剂量LMWH治疗组(n=12)：在注射12S和MS的基础上，孕14天起LMWH皮下注射200U/Kg，每日1次，共八天；D、高剂量LMWH治疗组(n=12)：在此基础上LMWH的用量加大为400U/Kg，每日1次，共八天；E、正常孕鼠组(n=6)及F、正常未孕鼠组(n=6)：与匹配组在相同时段注射等量生理盐水。每组分别测量鼠尾动脉血压，将妊娠第6、7、8、9天血压平均值作为基础血压，并记录第10、13、15、17、19天药物干预后的血压波动。孕8、12、18天收集24h尿液测定尿蛋白浓度。妊娠第18天颈总动脉取血1．8ml抗凝分离血浆，测定抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)及凝血4项(APTT、PT、TT、Fbg)。妊娠21天将孕鼠麻醉后，取血3ml测定血清NO及IL-6；剖腹取胎并摘取子宫、胎盘、肝、肾、脑组织，记录胎盘、胎仔等各项指标并观察子宫胎盘形态。用免疫组化法测定eNOS在子宫及胎盘中的表达，肝、肾、脑行病理组织学检查。测量未孕鼠在21天周期内相对应的各项指标，以利比较。
结果：1.应用2.0uμg/Kg剂量的内毒素(LPS)可使模型组孕鼠(A组)出现血压升高、尿蛋白增加及胎鼠发育迟缓等类似人类HDCP的表现。妊娠第10天注射12S后，模型组(A组)孕鼠血压升高到118.95±2.36mmHg，与正常孕鼠组(E组)92.12±3.60mmHg相比明显增高(P<0.01)，且有逐渐增高趋势并持续至分娩。孕15天B、C、D组干预治疗后，硫酸镁组(B组)较治疗前收缩压119.02±3.57mmHg相比显著下降至108.13±4.32mnHg(P<0.01)。低剂量LMWH治疗组(C组)及高剂量LMWH治疗组(D组)降压效果较单用硫酸镁组(B组)治疗无显著性差异(P>0.05)。而LMWH治疗组(C、D组)尿蛋白均明显低于治疗前(P<0.01)，高剂量L,MWH(D组)治疗后尿蛋白2958.5±67.0mg/L，明显低于低剂量LMWH治疗组(C组)的3610.4±143.1mg/L，差异有显著性(P<0.01)，较模型组(A组)尿蛋白8833.6±241.1 mg/L显著降低，且效果好于单用硫酸镁组(B组)治疗后的尿蛋白6038.8±129.1mg/L。应用LMWH治疗后，孕鼠体重、胎盘重量及仔鼠身长、体重均较A组、B组相比显著增加(P<0.01)。LMWH不增加仔鼠死亡率及畸胎率。
2.血清NO水平改变：①正常孕鼠组(E组)血清NO浓度为46.1±6.5μmol/L，较非孕鼠(F组)27.2±1.1μmol/L明显增高(P<0.01)。②模型组大鼠(A组)血清NO为21.7±4.2μmol/L较正常孕鼠(E组)显著下降(P<0.01)。③LMWH治疗组(C、D组)NO水平较模型组孕鼠(A组)均明显升高(P<0.01)，并显著高于硫酸镁治疗组(B组)的25.1±2.1μmol/L(P<0.01)。高剂量LMWH治疗组(D组)NO浓度39.6±8.8 μmol/L显著高于低剂量LMWH治疗组(C组)30.7±3.1μmol/L(P<0.01)。
3.IL-6水平改变：①模型组大鼠(A组)IL-6水平为0.126±0.01 pg/mL，较正常孕鼠组(E组)的0.060±0.01pg/mL及未孕鼠(F组)的0.055±0.01pg/mL相比显著增高(P<0.01)。②L,MWH治疗组(C、D组)IL-6水平均显著低于模型组(A组)(P<0.01)，且低于硫酸镁治疗组(B组)治疗后的0.113±0.01 pg/mL(P<0.05)。D组IL-6水平(0.086±0.05pg/mL)低于C组(0.094±0.06pg/mL)，但无显著性差异(P>0.05)。
4.免疫组化法测定eNOS在子宫及胎盘中的表达发现：模型组孕鼠(A组)子宫及胎盘中eNOS含量明显低于正常孕鼠(E组)(P<0.01)。L.MWH治疗组(C、D组)子宫及胎盘中eNOS含量明显高于模型组孕鼠(A组)及硫酸镁治疗组(B组)(P<0.01)。D组子宫及胎盘中eNOS含量高于C组(P<0.01)。
结论 1．采用鼠尾静脉注射超低剂量的内毒素(LPS)可使孕鼠出现血压升高、尿蛋白增加、内皮细胞受损、炎症反应激活、凝血功能增强及胎鼠发育迟缓等类似于人类妊娠期高血压疾病(HDCP)的特征性表现。
2．低分子肝素(LMWH)具有保护血管内皮细胞及调节免疫功能，可增加血清NO水平，降低血清IL-6水平，并减少孕鼠蛋白尿，使仔鼠体长、体重及胎盘重量增加，实验中未发现对仔鼠的不良影响。
3．低分子肝素疗效与剂量有关，高剂量LMWH(400U/Kg)增加血清NO含量及降低血清IL-6水平的效果均好于低剂量(200U/Kg)治疗组。