本文从以下几部分进行了论述。　　第一部分 125I-c(RGD)2肽与肺腺癌细胞A-549的结合、在荷瘤裸鼠体内分布及显像研究　　目的:通过放射性核素125I标记的新型c(RGD)2与肺腺癌A-549细胞的结合、125I-c(RGD)2肽在荷人肺腺癌裸鼠的体内分布及荷瘤裸鼠SPECT显像,旨在探讨其作为整合素αvβ3受体高表达的恶性肿瘤显像剂的可能性,为进一步研究其对肿瘤的治疗提供实验依据。　　方法:①氯胺T法标记c(RGD)2肽与放射性化学纯度测定;②测定125I-c(RGD)2肽的稳定性:在室温(25±2)℃和37℃时,将制备的125I-c(RGD)2肽分别置于0.9％生理盐水和人血清中,孵育不同时间;③测定125I-c(RGD)2肽与A-549细胞的结合率:取A-549细胞悬液调整细胞密度至1×106个/mL,将细胞按1×106个/孔接种在六孔板上,加入3.7KBq(50μL)125I-c(RGD)2肽,分别于1h、2h、4h、8h、16h、24h收集上清,用γ测量仪测量细胞的CPM计数(B)及上清液的CPM计数(F),125I-c(RGD)2肽的细胞结合率(％)=[B/(B+F)]×100％;④建立荷肺腺癌 A-549裸鼠模型;⑤125I-c(RGD)2肽在荷人肺腺癌裸鼠的体内分布:选取荷瘤裸鼠24只,采用随机数字表法分为6组,每组4只。采用尾静脉注射125I-c(RGD)2肽,分别于注射后1h、2h、4h、8h、16h、24h取各组裸鼠脏器和肿瘤组织,测量每克组织百分注入剂量(％ID/g)及肿瘤组织与非肿瘤组织的比值(T/NT);⑥125I-c(RGD)2肽在荷人肺腺癌裸鼠的SPECT显像研究:选取荷瘤裸鼠15只,采用随机数字表法分为5组,每组3只。采用尾静脉注射125I-c(RGD)2肽,另取0.05mL125I-c(RGD)2(放射性活度为1.036MBq~1.92MBq)做标准源,分别于注射后1h、2h、4h、8h、24h进行SPECT平面显像。　　结果:①125I-c(RGD)2肽标记率达63.92％±6.22％,放射性化学纯度达97.89％±0.23％;125I-c(RGD)2放化纯保持稳定,48h时仍达到97％以上;②加入125I-c(RGD)2肽1h、2h、4h、8h、16h、24h后,125I-c(RGD)2肽 A-549细胞的结合率分别为(5.89±0.84)％、(5.61±0.60)％、(4.29±0.84)％、(4.04±0.44)％、(3.49±0.99)％、(3.23±0.56)％,细胞结合率随时间的延长而下降,两者呈负相关(r=-0.813,P<0.05);③尾静脉注入125I-c(RGD)2肽后,肿瘤放射性较高,注射后1h肿瘤中％ID/g为4.56±1.08;肾脏放射性在各个时间点均最高,表明药物主要通过肾脏排泄。随着时间的延长,体内各器官的放射性摄取均逐渐减少,各器官的T/NT均随时间延长而呈上升趋势;④SPECT平面显像,1h即能显示肿瘤部位,但本底较高,随着时间延长,体内放射性大部分通过泌尿系统排出体外,本底放射性逐渐减少,肿瘤显像更加清晰,2-4h肿瘤显像最清晰,24h后肿瘤仍能较清晰地显像。　　结论:c(RGD)2肽可被125I稳定标记,125I-c(RGD)2肽对肿瘤αvβ3受体具有高度的选择性及亲和力,并且显像迅速,代谢速度快,有望成为非小细胞肺癌的靶向显像剂。　　第二部分 131I-c(RGD)2肽对肺腺癌细胞A-549杀伤效果观察　　目的:通过放射性核素131I、新型c(RGD)2及131I-c(RGD)2肽对肺腺癌A-549细胞的抑制作用的研究,验证131I-c(RGD)2肽对非小细胞肺癌靶向治疗作用。　　方法:①应用氯胺T标记c(RGD)2肽并测定标记率与放射性化学纯度;②实验组加入131I、c(RGD)2肽、131I-c(RGD)2肽(每孔含250μCi131I,6μLc(RGD)2肽,加入生理盐水调成含放射性活度及浓度一致的溶液),对照组加入20μL生理盐水,并设空白调零组,每孔设6个复孔,采用四甲基偶氮咗盐(MTT)比色法测吸光度(OD)值,测定细胞增殖抑制率(％)=(对照组OD值-实验组OD值)/对照组OD值×100％;③对照组加入1.0mL生理盐水,实验组分别加入131I、c(RGD)2肽、131I-c(RGD)2肽,用流式细胞仪检测(激发波长Ex=488nm,发射波长Em=530nm)不同药物作用后不同时间对细胞凋亡的影响。　　结果:①肺腺癌A-549细胞在铺板后前4天呈对数生长趋势,4~6天之间处于平台期,6天后开始下降;②以c(RGD)2肽为原料,进行131I标记,标记率达91.93％±1.7％,放射性化学纯度达99.06％±0.7％;③加入131I、c(RGD)2肽、131I-c(RGD)2肽后,各时间点对照组OD值均高于实验组。加入131I后24h、48h、72h OD值分别是0.224±0.134、0.524±0.061、0.961±0.013;加入c(RGD)2肽后24h、48h、72hOD值分别是0.244±0.310、0.507±0.358、0.968±0.119;加入131I-c(RGD)2肽后24h、48h、72h OD值分别是0.194±0.279、0.408±0.515、0.539±0.143,加药后各组细胞的OD值均随着时间的增加而增高,均与时间成正相关(P<0.01),加入131I-c(RGD)2肽72小时后,细胞的OD值下降最为明显;④计算加入131I、c(RGD)2肽、131I-c(RGD)2肽作用不同时间对细胞的抑制率。加入131I后24h、48h和72h的抑制率分别为(21.52％±4.71％)、(24.71％±8.81％)、(48.59％±0.70％);加入c(RGD)2肽后24h、48h和72h的抑制率分别为(14.99％±10.81％)、(27.06±5.15％)、(48.23±0.06％);加入131I-c(RGD)2肽后24h、48h和72h的抑制率分别为(31.93％±9.80％)、(41.32％±7.40％)、(71.09％±7.65％);各组的抑制率均随时间延长呈上升趋势,其中131I-c(RGD)2肽作用后各时间点对细胞的抑制率均最高;⑤131I、c(RGD)2肽、131I-c(RGD)2肽各组早期凋亡率均随着时间的延长而增高,其中131I-c(RGD)2肽作用各时间点早期凋亡率均最高。　　结论:131I-c(RGD)2肽对肺腺癌A-549细胞具有明显的抑制作用,且其抑制作用强于单纯使用131I和c(RGD)2肽,有望成为治疗非小细胞肺癌的新型靶向药物。