【摘 要】
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MicroRNA （miRNA）是长约19-24nt的单链非编码RNA,在转录后水平与靶基因3’非翻译区（3UTR）的碱基互补配对,通过促进靶基因mRNA的降解或抑制蛋白翻译,最终调节靶基因蛋白的表达；参与胚胎发育、细胞增殖及凋亡、疾病发生、新陈代谢等生物学过程。目前已证明有许多niRNAs参与脂肪细胞分化或脂代谢,如miR-375、miR-143、miR-103与miR-378可促进脂肪细胞分化
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MicroRNA （miRNA）是长约19-24nt的单链非编码RNA,在转录后水平与靶基因3’非翻译区（3UTR）的碱基互补配对,通过促进靶基因mRNA的降解或抑制蛋白翻译,最终调节靶基因蛋白的表达；参与胚胎发育、细胞增殖及凋亡、疾病发生、新陈代谢等生物学过程。目前已证明有许多niRNAs参与脂肪细胞分化或脂代谢,如miR-375、miR-143、miR-103与miR-378可促进脂肪细胞分化,而miR-27、miR-138、miR-130与let-7对成脂产生抑制作用。本实验室通过对7日龄和240日龄荣昌猪的背部脂肪进行solexa测序,发现miR-128a在脂肪组织发育早期和晚期表达丰度高,且之间具有显著性差异。靶基因预测发现,miR-128a有很多候选靶基因在脂肪细胞分化过程中具有重要的功能；所以,将miR-128a作为研究对象。这项研究对调节脂肪细胞分化的miRNA网络起到补充完善的作用,对脂肪细胞分化进一步的了解,也为遗传育种工作提供理论依据,主要研究结果如下：（1）构建包含pre-miR-128a序列的腺病毒载体,用Lipofecta mineTM2000转染,最终获得含miR-128a片段的腺病毒,命名为Ad-miR-128a。Ad-miR-128a侵染大鼠原代脂肪细胞,48h后检测miR-128a的表达量,发现miR-128a的表达量升高了5.31倍。（2） Ad-miR-128a处理大鼠原代脂肪细胞后,PPARy和aP2蛋白表达水平与对照相比均明显降低,油红O染色显示过表达miR-128a后脂滴变少,说明：miR-128a抑制脂肪细胞的分化。（3）本实验采用Pictar和TargetScan靶基因预测软件共同预测,并构建双荧光素酶报告基因载体,经过荧光素酶活性检测发现,IRS1是miR-128a的靶基因。
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