光合作用是植物所特有的生理功能，它是自然界最大规模的光能转化过程。光系统Ⅱ（PS Ⅱ）是绿色植物光合膜上存在的两个光反应中心之一，具有利用太阳光的能量来裂解水、释放分子氧并还原质体醌的功能。PSⅡ的各蛋白组分有序地排列在类囊体膜上，通过其结合的辅因子形成了独特的电子传递和水裂解体系。了解这些蛋白以何种方式装配成放氧核心复合物，对于揭示水裂解放氧反应和光能转换机理具有重大意义。 本文采用限制性蛋白酶解和化学交联法，对光系统Ⅱ放氧核心复合物蛋白亚基间相对空间位置进行分析，并探讨了化学交联处理对PSⅡ核心复合物叶绿素荧光和蛋白内源荧光的影响。 用于限制性蛋白酶解分析的5种菠菜PSⅡ制剂：含33kD蛋白的NaCl盐洗PSⅡ颗粒、不含33 kD蛋白的CaCl2处理PSⅡ颗粒、不含LHCⅡ的放氧核心复合物（HTG-OECC）、含33 kD蛋白的NaCl盐洗HTG-OECC和不含33kD蛋白的CaCl2处理HTG-OECC。分别用不同浓度的胰蛋白酶对这5种PSⅡ制剂进行限制性蛋白酶解处理，SDS-PAGE分析多肽组分变化。结果显示：在NaCl盐洗PSⅡ颗粒和CaCl2处理PSⅡ颗粒中，LHCⅡ容易被酶解；CaCl2处理PSⅡ颗粒比NaCl盐洗PSⅡ颗粒对胰蛋白酶作用敏感；与NaCl盐洗PSⅡ颗粒相比，在除去33 kD蛋白后，CaCl2处理PSⅡ颗粒的CP43更容易被酶解；放氧核心复合物对胰蛋白酶更敏感，在低浓度的胰蛋白酶作用下，CP47不被水解，而CP43、D2、D1和33 kD蛋白被部分水解，Western-blotting可以检测到它们的水解片段。上述结果表明：33 kD蛋白与CP43在空间位置上很接近。 采用双功能化学交联剂处理P引1 放氧核心复合物，借助SDS．PAGE 分析交联产物，可以判断蛋白组分的相对空间位置。本文主要用脂溶性交联剂建立了用于PSIJ放氧核心复合物的化学交联体系，该体系试验了六种双功能化学交联剂对PSll放氧核心复合物的交联效果，并用We stern七lotting鉴定放氧核心复合物形成的交联带的成分。结果显示：33 kD蛋白能与 CP47、CP43和 DZ蛋白交联；在交联剂EGS作用下CP47形成二聚体和发生DZ与CP43的交联；在DTSP处理下，33 kD蛋白、DI蛋白、CP29和部分LHCll组分形成110 kD左右的交联带，D；与部分LHCll组分组成了 55 kD交联带，CP29、PSb S及部分LHCll组分组成了 45 kD交联带c说明上述PSll放氧核心复合物蛋白组分在空间位置上的邻近关系，也暗示了它们在功能卜的联系。 用不同交联剂在不同浓度条件下交联处理PSll放氧核心复合物，测定交联样品的室温荧光发射光谱和荧光激发光谱。结果表明：交联处理对PSll 放氧核心复合物叶绿素荧光和内源荧光都有影响，引起682 urn处叶绿素荧光强度的降低、308 urn或 328 urn处蛋白质内源荧光强度的增大或减小，并与处理时所用交联剂的浓度、交联剂的亲疏水性和交联臂长相关。亲水性EDC对PSll的蛋白质中 Tyr和 TrP残基所处微环境的影响较小；而亲脂性DCC、HMDI． EGS、DTSP对PSll放氧核心复合物蛋白质中 Tyr、Trp微环境和 682 urn处叶绿素荧光影响大，可能它们参与了PSll放氧核心复合物内部的蛋白疏水区域交联。