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本试验用RT-PCR方法从conA刺激的四川山地乌骨鸡的脾淋巴细胞总RNA扩增了鸡白细胞介素16的cDNA。将分离的cDNA片段克隆到PMD18-T载体，进行序列测定分析。结果表明：山地乌骨鸡IL-16基因全部的开放阅读框1824bp，编码608个氨基酸。与Genbank数据库中的鸡IL-16序列进行同源性比较发现：与Xu，X等注册的基因序列比较同源性为99.7％，与Min，W等注册的序列比较同源性为99.5％，与Sayed，A. A.等注册的序列比较知同源性为99.2％，鸡IL-16基因在国内首次成功克隆，本试验所克隆的山地乌骨鸡IL-16丰富了鸡IL-16基因的资源库，为进一步研究提供了基础材料。该基因经BamHⅠ和EcoRⅤ双酶切后，插入同样经BamHⅠ和EcoRⅤ双酶切真核表达载体pcDNA3.1（+）中，经鉴定正确构建真核表达质粒。将质粒用阳离子脂质体包裹，分别或共同与IBV DNA疫苗联合免疫，观察IL-16分子佐剂对IBV DNA的佐剂效应。将将1日龄140只健康SPF雏鸡，随机分成七个组，每组20只（PBS组：空质粒pcDNA3.1组，IBV DNA疫苗组，pDNAIL-16+IBV DNA16组，pDNAIL16组，灭活疫苗组，弱毒疫苗组）。用间接ELISA测定其特异性抗体，结果表明，pDNAIL-16+IBV DNA组诱导产生的特异性抗体水平在35d内一直是最高的。21天时，与所有实验组比较出现差异极显著（P＜0.01）。CD4+、CD8+及CD3+T细胞亚群监测结果表明：pDNAIL-16+IBV DNA组能显著提高CD3+、CD4+、CD8+T细胞数量。特别能促进CD4+T细胞数量在免疫前期迅速增长。pDNAIL-16+IBV DNA组在免疫后14天，CD4+、CD8+T细胞数量就能分别达到峰值。而IBVDNA疫苗组和其它对照组要免疫后21天左右CD4+、CD8+T细胞数量才能达到一个峰值。测CD3+T细胞结果表明，在免疫后21d，pDNAIL-16+IBV DNA组和与DNA疫苗组比较差异显著（P＜0.05）。攻毒实验发现，IBV DNA疫苗联合佐剂pDNAIL-16组其死亡保护率（90％）显著高于单独的DNA疫苗组（85％），与弱毒苗组的死亡保护率相当（90％），但低于灭活苗组的保护率（100％）。本研究也显示了IBV DNA疫苗主要在免疫的中期发挥作用，pDNAIL-16分子佐剂能在免疫的早期发挥重要作用，特别对细胞免疫有迅速提高作用。将IBV DNA疫苗联合佐剂pDNAIL-16将使实验动物机体在整个免疫期较长的时间内具有较高的免疫水平。表明pDNAIL-16可以明显地增强IBV DNA疫苗的免疫作用，可作为一种有效的免疫增强剂。