大鼠胚胎卵巢原位移植的功能和子代健康安全性初步研究

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目的:建立大鼠胚胎卵巢原位移植模型,探讨大鼠胚胎卵巢原位移植后的生殖内分泌功能恢复情况,为进一步研究其生育和子代健康安全性提供实验基础。方法:将90只日龄50-60天的雌性SD大鼠随机分为移植受体组(研究组)50只、正常对照组(阳性对照组)20只、去势对照组(阴性对照组)20只。研究组行孕17-19天胎龄胚胎卵巢原位移植(同时切除自身卵巢)、阳性对照组仅行开关腹手术、阴性对照组行自身卵巢切除而不行胚胎卵巢移植。于术后45天随机取研究组、阳性和阴性对照组大鼠分别10只,共30只(其余60只雌性大鼠继续饲养供第二章实验用),采用电发光方法检测各组大鼠血清雌、孕激素水平,并同时剖腹探查卵巢发育情况、切除卵巢行病理切片HE染色观察卵泡发育情况。结果:(1)移植术后雌孕激素恢复情况:移植后45天,研究组、阳性和阴性对照组(每组各10只雌性大鼠)的雌激素均数±标准差分别为114.65±15.59 pmol/L.121.71±14.92 pmol/L和56.51±7.82 pmol、L,孕激素分别为12.79±4.40 ng、ml.13.00±1.18 ng/ml和3.70±0.68 ng/ml。研究组和阳性对照组间雌孕激素水平比较无显著性差异(p>0.05),而研究组和阴性对照组间雌孕激素水平比较有显著性差异。(p<0.05)。(2)移植后卵巢发育情况:移植后45天,研究组、阳性和阴性对照组的卵巢容积均数±标准差分别为0.22±0.07 ml、0.24±0.09ml和0ml,研究组、阳性对照组间卵巢容积比较无显著性差异(p>0.05)。光镜下研究组和阳性对照组卵巢内均可见不同阶段发育的卵泡和黄体形成。结论:大鼠胚胎卵巢原位移植术后的卵巢可以存活,并可生长发育而具有排卵功能,其生殖内分泌功能可以恢复。目的:探讨大鼠胚胎卵巢原位移植后生育功能的恢复情况。方法:将第一章研究中没有处死的大鼠胚胎卵巢原位移植受体组(研究组)40只、正常对照组(阳性对照组)10只、去势组(阴性对照组)10只雌性大鼠纳入本实验中。将三组动物于术后45天后分笼分别与日龄45-65天雄性大鼠同笼饲养(雌雄比例为2:1),观察40天,比较各组雌鼠妊娠和生育情况(观察到母鼠妊娠后即和雄性大鼠分开饲养)。观察40天后解剖研究组未孕雌性大鼠探查卵巢发育及其周围粘连并与正常对照组盆腔解剖情况比较,并观察卵泡发育情况,以判断没有生育的雌性大鼠的不孕原因。结果:(1)妊娠情况:研究组、阳性对照组、阴性对照组妊娠率分别为47.5%(19/40)、100%(10/10)、0.0%(0/10)。研究组雌性大鼠观察40天内的妊娠低于阳性对照组的,两者比较有显著性差异(p<0.05);研究组和阴性对照组的妊娠率比较有显著性差异(p<0.05)。(2)子代个数:研究组、阳性对照组、阴性对照组平均每次妊娠子代数目分别为7.0±2.2、10.5±2.3、0,研究组和阳性对照组每次妊娠生育的子代个数比较有显著性差异(p<0.05)。(3)不孕原因分析:研究组21只不孕大鼠卵巢内可见成熟卵泡发育及黄体;但其卵巢及输卵管周围均存在严重的粘连,而正常对照组无明显的盆腔粘连,这些可能是导致其不孕的主要原因。结论:雌性大鼠胚胎卵巢原位移植后具有自然生育功能;但由于术后盆腔局部粘连,它们术后妊娠率较正常对照组低,每次妊娠生育子代个数较正常对照组少。目的:初步探讨大鼠胚胎卵巢原位移植术后自然生育的子代的健康安全性问题。方法:(1)分别观察第二章研究中行胚胎卵巢原位移植术后确定妊娠的19只雌性大鼠和第二章研究中阳性对照组全部妊娠的10只雌性大鼠,妊娠后有无流产症象、有无死产、有无幼鼠死亡(观察至出生后3日),并比较观察结果;(2)随机抽取第二章研究中进行了胚胎卵巢原位移植术后自然生育的大鼠子代(研究组)及阳性对照组生育的大鼠子代(正常对照组)各40只,共80只子代大鼠;比较研究组(40只)和正常对照组(40只)35日龄时的体重;(3)应用常规G显带技术对两组子代大鼠进行核型分析,观察大鼠的染色体数目和结构的变异情况。以初步了解大鼠胚胎卵巢原位移植术后生育的子代的健康安全性。结果:(1)第二章研究中行胚胎卵巢原位移植术后确定妊娠的19只雌性大鼠和第二章研究中阳性对照组全部妊娠的10只雌性大鼠,妊娠后均无流产症象、无死产、无幼鼠生后3天内死亡;(2)子代生长发育比较:研究组和正常对照组35日龄的体重(x±s)分别为93.80±4.93g和94.13±4.53g。两组比较无显著性差异(P>0.05)。(3)胚胎卵巢原位移植大鼠子代(研究组)和正常对照组的核型均为42,XX或42,XY,两组均未发现染色体数目和结构异常。结论:大鼠胚胎卵巢原位移植后自然妊娠的孕鼠的流产、死产、幼鼠死亡率以及自然生育的子代的染色体数目、显带情况、子代的体重等与正常对照组比较无明显差异,初步提示大鼠胚胎卵巢原位移植后生育的子代在健康方面是安全的。
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