论文部分内容阅读
目的分析不同临床类型鼻咽癌鼻咽原发病灶瘤组织的蛋白质组学特征及其与中医证型的相关性,以从蛋白质表达特性角度探讨不同类型鼻咽癌患者的中医临床证候病理本质。方法纳入研究的鼻咽癌病例包括上行型15例、下行型18例、混合型17例,中医辨证结果为气阴两虚型22例、气血凝结型14例、火毒困结型14例;健康对照者15例。分别获取鼻咽原发病灶瘤组织或鼻咽黏膜组织,常规方法抽提全细胞总蛋白,然后应用双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)技术分别进行蛋白质分离,经考马斯亮蓝染色显色和凝胶图像分析,确认差异表达蛋白质点,再切取差异表达蛋白质点,经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)分析得到肽质量指纹图谱(peptide mass fingerprint, PMF),应用Mascot软件搜索SWISS-PROT和NCBI蛋白质数据库以对蛋白质进行鉴定,再通过差异表达蛋白质的生物信息学分析,结合各病例的临床症候表现,分析不同临床类型鼻咽癌患者中医证型的鼻咽原发病灶组织蛋白质组学特征,探讨其病机意义。结果经PDquest软件分析,本组病例的双向凝胶电泳图谱显示,鼻咽癌的不同临床分型及不同中医证型之间,其鼻咽原发病灶瘤组织标本的蛋白质组学特征差异明显。进一步进行质谱分析,将该类差异性表达蛋白点做MALDI-TOF-MS分析,再经Mascot软件搜索SWISS-PROT和NCBI蛋白质数据库鉴定蛋白质,数据库搜索鉴定了31个差异表达的蛋白质。结论1.鼻咽癌不同临床类型及不同中医辨证分型之间,其鼻咽原发病灶组织标本的蛋白水平上存在着明显的蛋白表达特征或差异性。2.将特异性的显著差异性表达蛋白进行MALDI-TOF-MS分析,结果发现这些蛋白质按功能主要肿瘤转移抑制相关蛋白质,分子伴侣,氯离子通道,钙结合蛋白质,与解毒相关蛋白质。3.nm23-H1蛋白与肿瘤转移特性及预后相关;与下行型比较,nm23-H在上行型鼻咽癌组织中呈现低表达状态,可能作为上行型鼻咽癌的分子病理候选标志。4.HSP70蛋白上调可作为候选的混合型鼻咽癌的相关蛋白质。5.机体抗损伤抗癌变的主要解毒功能发生改变,则可能是火毒困结证患者的特征。6.肿瘤细胞的粘附、运动能力增强,细胞侵袭能力较强,可能是气阴两虚证的特点,这也是气血凝结组与气阴两虚组的主要区别。