目的构建STAT3基因siRNA慢病毒载体,稳定抑制人肺腺癌A549细胞中STAT3基因表达,通过基因芯片检测稳定转染细胞中基因表达的变化。方法用设计合成好的两对互补的双链寡核苷酸构建质粒pSIH1- siRNA,同时设立pSIH1-negative为对照组。测序鉴定,并用两种质粒转染293T细胞,制备产生siRNA-STAT3与含空质粒分子的重组慢病毒,慢病毒感染人肺腺癌A549细胞后筛选稳定表达细胞系。应用Real Time-PCR对细胞中STAT3 mRNA表达水平进行分析。提取cRNA与基因芯片杂交,检测稳定转染细胞中基因表达的变化。结果慢病毒载体可以稳定地表达siRNA,具有很高的转染效率(转染效率大于90%)和较长时间的持续效应。获得了RNAi稳定抑制STAT3基因表达的细胞株,该细胞株中的STAT3mRNA表达显著降低。基因芯片技术检测表达上调两倍以上的基因29条,下调两倍以上的基因10条。结论慢病毒载体可以稳定地表达siRNA,并获得RNAi稳定抑制STAT3基因表达的细胞株,在此细胞株出现部分上调与下调的基因。这些基因与STAT3信号途径及肺腺癌A549细胞发生及发展有一定关系。