基于TLR4信号通路探讨薯蓣粥对2型糖尿病大鼠的降糖机制

来源 :福建中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zkl_2009
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目的通过观察T2DM大鼠TLR4信号通路相关TLR4蛋白、TLR4 mRNA、LPS、炎性因子TNF-α、IL-6、CRP等的变化,探讨薯蓣粥对T2DM大鼠的降糖机制,为薯蓣粥的再续性研究及推广应用提供科学依据。方法将48只SPF级雄性Wistar大鼠,按体重随机分为正常组10只和造模组38只,分别给予普通饲料和高脂高糖饲料饲养。6周后禁食12 h过夜,造模组腹腔注射25 mg/kg的STZ缓冲液,72 h后尾静脉采血检测FPG,并继续观察2周,最终以连续非同日2次FPG≥11.1 mmol/L,并伴有多饮、多食、多尿、体重减轻等症状,即可判定为成模T2DM大鼠。造模成功后,30只成模大鼠再根据最后一次FPG值的高低进行编号,并用随机数字表法分为模型组、阳性对照组、薯蓣粥组,每组10只。正常组和模型组每日上午9:00生理盐水15 ml/kg灌胃1次,阳性对照组每日上午9:00二甲双胍15 ml/kg灌胃1次,薯蓣粥组每日上午9:00薯蓣粥15 ml/kg灌胃1次,连续干预6周。干预期间每周监测FPG,隔周称重,干预结束后Western-blot法检测TLR4蛋白的表达,RT-PCR检测TLR4 mRNA的表达,ELISA检测T2DM大鼠血清LPS、炎性因子TNF-α、IL-6、CRP水平。结果1 T2DM大鼠模型的建立与造模前相比,造模后造模组大鼠体重减少,FPG升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与正常组相比,造模后造模组大鼠体重下降,FPG升高,差异具有统计学意义(P<0.01),同时造模组大鼠摄食量、饮水量、尿量明显增加。2 干预后各组大鼠血清LPS表达水平比较与正常组相比,模型组LPS表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,薯蓣粥组LPS表达水平明显降低(P<0.01)。与阳性对照组相比,薯蓣粥组LPS表达水平无明显差异(P>0.05)。3 干预后各组大鼠TLR4蛋白表达水平比较与正常组相比,模型组TLR4蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组相比,薯蓣粥组TLR4蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。与阳性对照组相比,薯蓣粥组TLR4蛋白表达水平无明显差异(P>0.05)。4 干预后各组大鼠TLR4 mRNA表达水平比较与正常组相比,模型组TLR4 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组相比,薯蓣粥组TLR4 mRNA表达水平明显下降(P<0.05)。与阳性对照组相比,薯蓣粥组TLR4 mRNA表达水平无明显差异(P>0.05)。5 干预后各组大鼠血清炎性因子TNF-α、CRP、IL-6表达水平比较与正常组相比,模型组TNF-α、IL-6、CRP表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,阳性对照组和薯蓣粥组TNF-α、IL-6、CRP表达水平均明显降低(P<0.05)。与阳性对照组相比,薯蓣粥组IL-6、CRP表达水平更低,差异具有统计学意义(P<0.01)。6 干预后各组大鼠FPG 比较与正常组相比,模型组大鼠FPG明显升高(P<0.01)。与模型组相比,阳性对照组和薯蓣粥组FPG均下降(P<0.05)。与阳性对照组相比,薯蓣粥组FPG下降无明显差异(P>0.05)。7 干预后各组大鼠体重比较与正常组相比,模型组大鼠体重明显增加(P<0.01)。与模型组相比,阳性对照组和薯蓣粥组体重增加无明显差异(P>0.05)。与阳性对照组相比,薯蓣粥组体重增加也无明显差异(P>0.05)。结论薯蓣粥干预6周后,T2DM大鼠结肠组织TLR4蛋白和TLR4 mRNA表达水平下降,血清LPS、炎性因子TNF-α、IL-6、CRP表达水平减少,同时改善T2DM大鼠的FPG和T2DM相关症状,提示薯蓣粥可能通过抑制TLR4信号通路的表达,改善炎症反应,发挥降糖作用。
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