生姜组织培养快繁及离体保存技术研究

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生姜的生产越来越受到重视,种植面积和需求量不断扩大。作为无性繁殖蔬菜,生姜生产的发展受到其自身繁殖系数低的严重影响,另外,生姜种质资源的保存也在很大程度上受其繁殖特性的制约。本试验对山东莱芜大姜进行了组织培养快繁,微型姜诱导及常温保存技术研究。目的在于为生姜生产的快速发展建立可行的快繁技术体系,为种质资源的安全和有效保存提供技术指导。用生姜茎尖培养获得了组培苗,建立起了良好的的扩繁体系。通过对蔗糖、6—BA(6-苄基腺嘌呤)、NAA(萘乙酸)、PP333(多效唑)和光照条件的调控,由组培苗成功地诱导出微型姜。主要结果如下: 1.建立起了生姜有效的组培扩繁体系。以生姜茎尖为材料,以MS为基本培养基,通过调节6—BA和NAA的浓度,认为MS+NAA0.1mg/l+6-BA3.5mg/L为新稍诱导的较适合培养基,它对提高芽分化率,增加苗数最有利。在继代培养中,以培养基MS+NAA0.1mg/l+6-BA2.0mg/L的增殖率最高,增加苗数最多,同时MS+NAA0.1mg/l+6-BA3.5mg/L表现出高的增殖率。与新稍诱导相结合,MS+NAA0.1mg/l+6-BA3.5mg/L更适合生姜的组培扩繁。姜块二次培养MS+NAA0.1mg/l+6-BA1.5mg/L效果最好,增殖率最高。姜块二次培养可比生姜初次接种时的成苗时间快4倍左右。 2.微型姜的诱导研究获初步结果。试验中的诱导因素涉及蔗糖浓度、6—BA、NAA、PP333的浓度以及培养的光照条件。培养基中的蔗糖浓度达6%时,微型姜的诱导效果最佳:0.5mg/L6—BA、0.1 mg/L NAA,PP333对微型姜的诱导均有一定的促进作用;12小时光照,3500Lux光照强度对微型姜形成起促进作用,暗培养阻碍微型姜的形成。 3.生姜试管苗常温保存5个月仍不需继代。将扩繁培养后得到的试管苗,接种在12种不同培养基中,在光照强度为2500Lux(12小时/天)、25±1℃下保存5个月。结果显示:在培养基中加入甘露醇和蔗糖可以有效抑制试管苗生长,蔗糖浓度对试管苗株高的影响差异显著。在一定范围内,蔗糖浓度越高,保存效果越好;甘露醇的抑制效果与蔗糖相比更强烈。综合试验结果得出,蔗糖浓度30g/L,甘露醇浓度20g/L的培养基对生姜试管苗保存效果最好。
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