同型半胱氨酸致动脉粥样硬化机制的实验研究

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目的 高同型半胱氨酸血症(Hyperhomocysteinemia,HHcy)是近年确立的动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)的新的独立危险因素,但其致病机制还不十分清楚。血管内皮功能障碍是AS的始动环节。同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)可通过破坏内皮屏障、诱导内皮细胞调亡、增加内皮表面黏附因子的表达、抑制一氧化氮(Nitric oxide,NO)合成等损害内皮功能,进而导致AS的发生发展。氧化低密度脂蛋白(Oxidized low densitylipoprotein,oxLDL)在血管内皮功能失调和AS中起着至关重要的作用。凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1 (Lectin-like low density lipoproteinreceptor-1,LOX-1)是oxLDL在血管内皮细胞的特异受体,它的可诱导表达介导了oxLDL的多种致AS作用。叶酸与Hcy的代谢紧密联系,叶酸的摄入缺乏导致HHcy。叶酸治疗对内皮功能也有改善作用,能降低心血管疾病的风险。他汀类为3-羟3-甲基戊二酰辅酶A(3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzyme A,HMG-CoA)还原酶的特异性竞争抑制剂,其包括改善内皮功能在内的非调脂作用所带来的临床益处远远超出其本身的调脂作用。本研究试图通过观察Hcy与叶酸、氟伐他汀对HUVECs LOX-1表达的影响来深入探讨Hcy致AS的可能分子机制。 方法 应用不同浓度(0μmol/L、10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、500μmol/L)Hcy孵育培养的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical veinendothelial cells,HUVECs)24小时后,或分别应用各浓度的叶酸(50μmol/L、100μmol/L)和氟伐他汀(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)与Hcy(100μmol/L)共同孵育HUVECs24小时后,利用半定量的逆转录-聚合酶链式反应(Semi-quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法检测HUVECs上LOX-1的mRNA表达水平的改变。 结果 (1)空白对照组的LOX-1 mRNA表达微弱。生理剂量的Hcy组(10μmol/L组)与空白对照组相比上调HUVEC的LOX-1 mRNA表达,但
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