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本文探讨了弧菌感染凡纳滨对虾的主要方式,研究了环境条件不利时感染弧菌的对虾的抗病力的变化以及副溶血弧菌噬菌体对对虾弧菌病的防治,以期为对虾健康和无公害养殖提供理论依据。主要实验结果如下:
(1)感染方式直接影响到副溶血弧菌对凡纳滨对虾的感染情况。注射感染、投喂感染、创伤感染和浸浴感染都能引起健康对虾发病死亡。其中以注射感染最易使对虾患病死亡,投喂感染次之。另外还发现当养殖水质条件恶化时,浸浴感染和创伤感染能导致对虾30-40﹪的死亡率。
(2)副溶血弧菌噬菌体对海水中的副溶血弧菌的清除作用迅速,5d实验时间内,每隔一天可使水体中的副溶血弧菌的数量降低1-2个数量级,大大减少了养殖水体中弧菌对对虾的侵袭,导致用噬菌体防治弧菌感染组中的对虾各组织器官内弧菌数量远远低于未用噬菌体防治的弧菌感染组。同时实验当中还发现,24h内该噬菌体能存活于对虾鳃,肠道,肌肉和肝胰腺内,这可能对对虾体内弧菌的清除起到一定积极的作用,但其清除对虾体内弧菌的机制有待进一步的研究。
(3)7d内,0.75mg/L氨氮能刺激凡纳滨对虾,使对虾血清PO,ACP和SOD活力增强,分别是对照组的156﹪,107﹪和106﹪,长时间的氨氮胁迫能使对虾的抗病力下降。14d时所有实验组对虾的THC、血清PO、CAT、ACP、SOD活力均远低于对照组。弧菌能显著影响对虾THC,血清PO、CAT、ACP、SOD活力,14d时各实验组的对虾抗病力指标均远低于相对应的氨氮胁迫组。弧菌感染的同时用噬菌体来防治,实验发现在氨氮为0.05mg/L时,14d时对虾THC,血清CAT、ACP活力较7d高,分别为132.31﹪、105.72﹪、102.58﹪,但在高浓度的氨氮条件下,结果却相反。以上结果说明氨氮能降低健康对虾和染病对虾的抗病力,当对虾感染弧菌病时,首当其先的是控制好养殖水质,再投放噬菌体进行防治。
(4)3d内,0.075mg/L亚硝酸氮能刺激对虾血清PO、SOD、ACP活力升高,分别为对照组的122﹪、103﹪、108﹪,7d后各实验组对虾THC,血清PO、SOD、ACP,CAT活力均低于对照组。对虾感染弧菌初期,0.005mg/L亚硝酸氮和弧菌在3d内能刺激对虾,使对虾血清PO、SOD、ACP比0d高,分别为250﹪、107﹪、131﹪,但到14d时,各实验组对虾的抗病力指标远低于正常实验组。在噬菌体防治组中发现,亚硝酸氮浓度为0.005mg/L,14d时对虾THC、血清PO、CAT、ACP、SOD,活力为7d的102﹪、64﹪、108﹪、79﹪、85﹪。以上结果说明亚硝酸氮能降低健康对虾和染病对虾的抗病力,只有在水质条件较好时,噬菌体对对虾的弧菌病防治效果良好。
(5)将水体温度在1小时内从28℃分别降至18℃和14℃,在降温后9小时内测定凡纳滨对虾肝胰腺中丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性。对虾肝胰腺中MDA含量随实验时间延长而逐渐增加。SOD、CAT酶活力在1h内呈上升趋势。1h后则逐渐下降,且9h时对虾体内的SOD、CAT酶活力低于0h。9h时在温度突变组(28℃-18℃)中对虾虾肝胰腺中MDA的含量较温度突变组(28℃-14℃)要低,而SOD、CAT酶活力却比温度突变组(28℃-14℃)要高。这说明温度突变会影响对虾的生理功能和免疫防御能力,这可能是诱导病害发生的环境因素之一,且温差越大,这种影响也越大。实验还发现弧菌能使对虾体内脂质过氧化产物的量比未加弧菌的实验组要高,从而间接导致对虾体内抗氧化酶受到破坏。噬菌体在温度突变范围不大(28℃-18℃)时,能缓解弧菌对对虾这种破坏作用,减少对虾体内脂质过氧化作用。