鳜胰岛素样生长因子基因的克隆、特征与表达分析

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tiandiren100
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
采用RT-PCR、cDNA末端快速扩增法(RACE)等分子克隆技术获得了鳜(Siniperca chuatsi)肝组织胰岛素样生长因子-Ⅰ和Ⅱ(Insulin-like growth factor-Ⅰ,Ⅱ)基因cDNA全长序列,并分析它们的结构特征;用实时荧光定量RT-PCR检测分析了它们在肝脏、肾、脑、前肠、后肠、性腺、胃、脾、鳃、心、肌肉组织,以及孵化后0、2、4、6、8、10、12、14、16、19天幼体中的表达特征。结果表明:(1)鳜胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)cDNA全长共1784bp,包括5’端非翻译区233bp,3’端非翻译区990bp和开放阅读框561bp,共编码186个氨基酸,由信号肽、成熟肽、E肽三部分组成,其中,信号肽44个氨基酸,成熟肽68个氨基酸,E肽74个氨基酸;成熟肽由B、C、A、D 4个区域组成,E肽分析表明,鳜IGF-Ⅰ属Ea-4型;鳜IGF-Ⅰ氨基酸序列与其他脊椎动物IGF-Ⅰ氨基酸序列相似度达81%~99%。鳜胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)cDNA全长共1643bp,包括5端非翻译区103bp,3’端非翻译区892bp和开放阅读框648bp,共编码215个氨基酸,由信号肽、成熟肽、E肽3部分组成,其中,信号肽47个氨基酸,成熟肽70个氨基酸,E肽98个氨基酸;鳜IGF-Ⅱ氨基酸序列与其它脊椎动物IGF-Ⅱ氨基酸序列相似度达到81%-98%,与鳜IGF-Ⅰ氨基酸序列相似度仅为62.5%。(2)IGF-ⅠmRNA在肝脏中表达量最高,肾、脑、后肠、性腺中表达量次之,胃、脾、前肠、鳃、心、肌肉中表达量较低;IGF-ⅡmRNA在在脑中表达量最高,肌肉、心、胃、鳃、肾中表达次之,脾、前肠、后场、性腺、肝中表达量较低。(3)幼体早期发育过程中,IGF-ⅠmRNA在孵化后0、2、4、6、8、10、12、14、16、19天各期幼体均有表达,表达量逐渐升高;IGF-ⅡmRNA在胚胎孵化后各期均有表达,孵化当天表达量最高,之后表达量略有降低。以上结果为进一步研究它们对鳜生长发育调控作用奠定了分子基础。
其他文献
在互联网普及的大背景以及全面推行素质教育的要求下,为了培养创新型以及符合国家发展要求的人才,需要大力推行开展信息技术课程.在如今这样的信息时代,技术发展日新月异,信
随着课程改革的不断深入,出现了很多新的教学方法以及教学内容.老师应该对自己的教学观念进行转变,并且通过不同的教学方法来提高学生的积极性.本文首先介绍了小组合作学习的
初中英语教学是为学生未来英语学习奠定基础的重要教学阶段,其中英语语法教学是初中英语教学中最为主要部分.思维导图是新课改期间推广应用的一种教学方式,可使学生对所学知
《语文课程标准》中明确强调要培养学生积极情感的态度目标,所以在教学过程中,不仅要重视知识技能的传输,更要关注学生的情感态度,以及学生在学习方面的需求,探讨如何使学生
本研究通过实验室分析和动物饲养及消化试验,研究了日粮中添加不同梯度的葡萄渣和籽对成年母羊体重和表观消化率的影响,以寻求在成年羊日粮中添加葡萄渣和籽的最佳量,探索葡萄渣
在英语学习的过程中,听力是非常重要的一部分内容.但是大多数老师在教学的时候都会忽略与听力有关的内容,使得学生没有办法得到更多的练习.何况听力的提升是一个长期的过程,
近年来,教育教学对课堂教学提出了新的更高的要求,教师如何紧跟时代发展落实教学要求是当前所有教师一致思考的问题.对于学生来说,合理有效的教学方法,能够在提升学生学习兴
新课改背景下,高中生物课教学进行了一定改革及优化,对情景教学设计进行了一定探讨及应用,目的是培养学生各项能力,促进高中生物教学质量提升.