人脐源性胰岛前体细胞移植治疗1型糖尿病的实验研究

来源 :贵州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ciha
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:  评价hUMSCs在体外诱导为胰岛前体细胞后治疗T1D大鼠的效果。  方法:  1.分离、培养及鉴定hUMSCs;2.取第4代hUMSCs采用分阶段联合诱导方法诱导并观察诱导后细胞形态变化;3.分别取诱导后第7d、14d和21d细胞进行免疫荧光技术检测Ngn3、胰岛素和MafA表达;Western-blot法检测诱导后第7d、14d和21d细胞MafA和Glut2蛋白表达;4.选择正常雄性SD大鼠44只,随机分为诱导细胞组、干细胞组、模型组和正常组,正常组给予生理盐水,余均给予链脲佐菌素腹腔注射建立T1D模型;5.将经CM-DIL标记的胰岛前体细胞移植到糖尿病大鼠胰腺被膜下,实验周期为60天,分为2W、4W、6W、8W四个时间段,观察各组血糖和体重变化情况;HE染色观察大鼠胰岛形态;Western-blot法检测各时期各组MafA表达改变;分析移植后MafA和大鼠血糖相关性;分析MafA在干细胞组和诱导细胞组之间的表达差异性。  结果:  1.成功分离培养出hUMSCs,诱导后细胞形态宽大、出现集落;2.免疫荧光技术检测Ngn3、胰岛素和MafA蛋白均为阳性表达;Western-blot检测诱导后细胞MafA在正常组和7d时几乎无表达,14d和21d组稍增高,Glut2在7d增高,14d时达高峰,21天时稍弱;3.共有38只大鼠成模,实验组大鼠血糖于第7天时升高;细胞移植后,干细胞组和诱导细胞组血糖均不同程度下降,但诱导细胞组降低更明显,模型组仍维持在高血糖状态;模型组体重在整个实验过程中呈现持续降低,诱导细胞组和干细胞组体重均在第4周后呈升高趋势;4. Western-blot法显示移植后各组均能检测到MafA表达且均呈升高趋势,干细胞组在第6W时明显升高,诱导细胞组在第4W时明显升高;移植后MafA和血糖相关性两组均呈负性相关;MafA在干细胞组和诱导细胞组之间的表达无差异性。  结论:  人脐带间充质干细胞在微环境下诱导可诱导分化为胰岛前体细胞,干细胞和胰岛前体细胞移植后对T1D鼠有降血糖和升高体重的作用。
其他文献
背景:急性心肌梗死是冠心病发展到一定阶段的严重类型,在心血管系统疾病中有着较高的发病率及死亡率。据统计全世界每年大约2000万人死于该类疾病,致命性心律失常甚至心源性猝死
Rab蛋白是属于Ras蛋白超家族的小G蛋白(small G-protein or small GTPase),分子量大多在22-25 kDa之间,表达于从酵母、果蝇、小鼠到人类等各种真核生物中,发挥着各种各样的功能;
背景和目的:由于夜间光照延长和不规范饮食,代谢紊乱疾病盛行已越来越引起人们重视,例如代谢综合征。褪黑素受体依赖和非受体依赖的昼夜节律调节机制可能在改善人们代谢紊乱
目的:本研究旨在通过青霉素致癫大鼠动物模型在体研究的方法观察人参皂甙是否对青霉素致癫大鼠模型具有一定的影响,为临床上治疗癫痫药物的选择提供新的研究方向。方法:本研究选取生后10d的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠54只为研究对象,体重20-40g,清洁级。54只新生SD大鼠随机分为三组,其中18只大鼠作为正常对照组,其余36只用于癫痫模型制备。根据文献采用腹腔内注射青霉素的方法制作新生
痢疾杆菌是一种危害人类健康的重要病原体,每年全球有1.6亿人感染痢疾杆菌,引起1100万死亡,其中大多为5岁以下的儿童和老人。在我国每年1000万病例中,大多是由福氏志贺菌株引起的。另外,痢疾杆菌致病与菌株的毒力基因密切相关,因此,了解菌株中毒力相关基因及毒力岛的分布情况对痢疾的防控具有重要意义。在本研究中,我们采用PCR和打点杂交的方法检测了sat、ial、sen、setA、ipaH、icsP、