苹果多酚的提取、分离及降血糖活性成分研究

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苹果多酚是苹果中一类重要的生物活性物质,是天然的自由基清除剂,具有防治心血管疾病、抗癌、抗衰老等生理功效。课题组前期研究表明,苹果多酚提取物可改善小剂量链尿佐菌素诱导的I型糖尿病鼠的血糖水平。本文以苹果多酚提取物为研究对象,以柱色谱为主要分离方法,以确定其中降血糖活性成分为研究目的;为降低降血糖活性成分分离难度,减少工作量,首先通过大孔树脂柱色谱将苹果多酚提取物分为极性不同的几个部分,通过糖尿病鼠模型实验确定活性部位。然后通过硅胶柱色谱、开放ODS柱色谱、Toyopearl及Sephadex凝胶柱色谱等分离手段,结合制备型高效液相,从苹果多酚活性部位中分离得到25个单体化合物,利用理化性质、现代波谱方法,如紫外光谱、高分辨率质谱、一维、二维核磁共振谱等方法鉴定出其中23个化合物的结构,分别为:对香豆酸(1),咖啡酸(2),5-O-对香豆酰奎尼酸(3),4-O-对香豆酰奎尼酸(4),4-O-对香豆酰奎尼酸甲酯(5),1-O-对香豆酰奎尼酸甲酯(6),1-O-咖啡酰奎尼酸甲酯(7),1-O-咖啡酰奎尼酸乙酯(8),3-羟基根皮苷(9),根皮素-2’-木糖基葡萄糖苷(10),3-羟基根皮素-2’-木糖基葡萄糖苷(11),根皮素-2’-木糖基半乳糖苷(12),花旗松素(13),槲皮苷(14),槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(15),根皮素(16),根皮苷(17),3,5-二-O-咖啡酰奎尼酸(18),CinchonainIa(19),Rhinchoin Ia(20),Cinchonain Ib(21),Rhinchoin Id(22),CinchonainId(23)。其中化合物8为未见文献报道的新化合物,化合物18-23为首次从苹果中分离得到。为了更好地确定苹果多酚活性部位的化学成分组成,本文还通过高效液相方法分析其化学成分,指认了高效液相色谱图中14个色谱峰,占色谱峰总面积的82.1%,并测定了主要成分的含量。对分离得到的化合物进行促胰岛细胞增殖实验,结果表明,化合物1、7、9、11、12、16对胰岛β细胞均有不同程度的增殖作用,且化合物11、12对胰岛β细胞增殖效果显著。本文还对不同品种苹果果皮、果肉中总三萜的含量进行了研究,为苹果中总三萜的研究以及产品开发提供依据。
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