【摘 要】
：
暴露于寒冷空气中能够导致畜禽冷应激的发生,在我国北方及高寒地区因极端天气造成的畜牧业损失时有发生。肠道作为与外界环境相通的组织之一,虽然在长久的进化中,肠上皮细胞中内质网等细胞器功能强大足以应对复杂的肠道环境,但在应激状态下,内质网也会超过负荷,造成肠上皮细胞功能紊乱,内环境失衡等,对肠道的功能及机体健康带来危害,致肠道炎症性疾病的发生。SIRT2作为一种能够调节蛋白质乙酰化修饰的NAD+依赖性烟
【基金项目】
：
国家自然基金项目（No.32172817）； 省自然基金项目（No.LH2020C081）；
论文部分内容阅读
暴露于寒冷空气中能够导致畜禽冷应激的发生,在我国北方及高寒地区因极端天气造成的畜牧业损失时有发生。肠道作为与外界环境相通的组织之一,虽然在长久的进化中,肠上皮细胞中内质网等细胞器功能强大足以应对复杂的肠道环境,但在应激状态下,内质网也会超过负荷,造成肠上皮细胞功能紊乱,内环境失衡等,对肠道的功能及机体健康带来危害,致肠道炎症性疾病的发生。SIRT2作为一种能够调节蛋白质乙酰化修饰的NAD+依赖性烟酰胺脱乙酰化酶,广泛参与衰老、分化、细胞死亡等各种生物进程,在多种组织器官中广泛表达,但其对畜禽应激功能的调控作用尚未完全了解。因此,本试验聚焦于冷应激仔畜各类肠道疾病高发这一热点问题,拟以小鼠回肠组织为研究对象,欲探究小鼠回肠组织对冷暴露的响应,同时揭示SIRT2调控冷应激小鼠回肠结构和功能的作用机制,进而为防治冷应激仔畜肠道疾病提供科学依据。本试验以C57BL/6J小鼠为研究对象,将小鼠随机分为常温对照组和冷暴露组,以温度为4°C,每天3 h,持续3周的条件进行冷暴露处理,采用HE染色、Masson染色、TEM检测、免疫荧光、肠道通透性测定和Western blot等技术检测各组小鼠回肠组织的形态学和超微结构变化,紧密连接相关蛋白、促炎细胞因子、内质网应激和自噬相关指标的蛋白表达,SIRT2的表达和Fox O1的乙酰化修饰水平。同时,通过对SIRT2-/-小鼠进行冷暴露处理,利用上述技术检测相关指标,以探究SIRT2对冷暴露损伤回肠紧密连接的调控作用。随后,利用小鼠小肠上皮细胞系MODE-K进行体外试验,通过内质网应激的刺激方式（体外模拟冷应激状态）,采用质粒转染、Western blot及免疫荧光等技术,揭示SIRT2对应激状态下小鼠小肠上皮细胞紧密连接损伤的调控机制。结果显示:慢性冷暴露造成肠道通透性增加,回肠形态结构改变;Western blot结果显示,冷暴露造成紧密连接相关蛋白（ZO-1、Claudin1和Occludin）的表达下调;增加促炎细胞因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）和内质网应激相关指标（GRP78、CHOP、p-e IF2α和XBP1s）的表达;同时LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p62和Beclin1的表达升高;慢性冷暴露抑制SIRT2的表达,增加Fox O1乙酰化修饰。在冷暴露状态下,敲除SIRT2可缓解回肠紧密连接相关蛋白（ZO-1、Claudin1和Occludin）下调,降低肠道通透性并缓解冷暴露造成的结构损伤。使自噬相关蛋白（LC3II和Beclin1）的表达增强,p62的表达下调。在冷暴露状态下,敲除SIRT2使回肠上皮细胞内内质网扩张呈球形线粒体电子密度增加,CHOP的表达被抑制,促进XBP1s的表达,而对GRP78和p-e IF2α的表达无显著影响,并伴随促炎细胞因子IL-6高表达。SIRT2敲除显著增加了AC-Fox O1的表达。在内质网应激状态下,抑制SIRT2能够上调ZO-1的表达,并伴随着AC-Fox O1高表达及自噬体数量增加。随后使用雷帕霉素和3-MA在sh-SIRT2+Tg模型基础上分别构建自噬激动模型和自噬抑制模型,以分析自噬对ZO-1和Claudin1的影响。结果显示:与Tg+sh-SIRT2处理组相比,抑制自噬能够显著降低ZO-1的表达,对Claudin1的表达也有下调趋势。综上所述,冷暴露能够造成小鼠回肠内质网应激的发生,损伤紧密连接,增加肠道通透性;在应激状态下,SIRT2的缺失可上调Fox O1的乙酰化修饰,加强自噬的发生,缓解紧密连接损伤,降低肠道通透性。
其他文献
在奶牛养殖行业中,奶牛乳房炎与奶牛肢蹄病是限制奶牛养殖业发展的两种重要疾病,且在疾病早期难以诊断,导致奶牛病情愈加严重而淘汰,对奶牛养殖行业的发展影响巨大。在奶牛的所有蹄病中,蹄皮炎发病率最高,造成的经济损失最大。准确评估蹄皮炎的不同阶段,有助于正确诊断和有效治疗该疾病。奶牛乳房炎病因复杂,绝大部分乳房炎是由于病原菌侵入乳腺组织引起的,奶牛乳导管是病原菌侵入乳腺的主要途径,所以定期进行奶牛乳头末端
本试验采用发酵玉米蛋白粉（Fermented corn gluten meal,FCGM）为试验材料,探讨FCGM的营养价值、体外发酵参数,对羔羊生长性能、血液指标及粪便菌群微生物的影响,为FCGM在羔羊养殖生产中的应用提供理论依据。（1）FCGM替代豆粕对绵羊瘤胃体外发酵参数的影响本试验采用单因素完全随机设计,试验选用5只体重（35.00±2.50）kg、健康的小尾寒羊作为瘤胃液供体。试验分为1
犬急性胰腺炎（Acute pancreatitis,AP）是以胰腺水肿、出血、坏死、炎症反应为主要病症的多发疾病,病情恶化继发生全身炎症综合征并可伴有器官功能障碍。脂肪干细胞（ADSCs）是一种具有自我更新、多向分化潜能、易于获取和繁殖能力强的多能干细胞,在疾病的治疗中显现巨大潜力。但是其在犬AP中的作用效果和作用机制尚未阐明。因此,本研究拟探究犬ADSCs和脂肪干细胞条件培养基（ADSCs-CM
牛病毒性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhea Virus,BVDV）可致牛消化道、呼吸道和生殖系统的严重损伤,对养牛业造成极大的威胁。N~6-甲基腺嘌呤（N~6-methyladenosine,m~6A）是动植物RNA中最丰富的内部修饰,研究证实其在丙型肝炎、寨卡等病毒RNA中存在,并调节病毒复制及蛋白表达。前期发现BVDV感染可导致MDBK细胞m~6A甲基化修饰的动态变化,但不确
《民法典》第1185条规定了知识产权惩罚性赔偿制度,这意味着我国知识产权领域惩罚性赔偿立法的体系和框架已基本形成。当下我们对知识产权惩罚性赔偿讨论重点应当从理论研究转移到司法适用方面。通过对一定数量的样本案例进行研读、分析可以发现,惩罚性赔偿的司法实践在商标侵权领域积累了一定经验,这也为其他类型的知识产权侵权案件提供了参考,但惩罚性赔偿整体上仍存在适用不足、适用不恰当现象。适用不足体现在与法定赔偿
动物通过争斗行为来确定其在群内的社会等级,一个动物在群内的社会等级对其生活的环境空间大小、营养物质的摄入、繁殖活动都有重要的影响。鹅繁殖行为（包括求偶、爬跨和交尾等行为）是影响繁殖效率的重要因素。提高繁殖效率,选育具有高繁殖力的公鹅始终是重要的育种目标之一。在自然交配条件下,社会等级对鹅的繁殖效率有重要影响,为了准确评估不同社会等级公鹅的遗传贡献率,本研究采用亲权效率（PE）来衡量不同公鹅遗传贡献
近年来,尽管哺乳动物肠道菌群的早期来源和定植规律不断得到揭示,但新生犊牛肠道早期菌群的来源与定植规律仍未确定。因此,本试验以围产期奶牛及其所产犊牛为试验动物,借助16S rRNA扩增子测序技术,探究围产期奶牛胎盘、脐带、羊水、唾液、产道粘液、初乳和粪便菌群对其所产犊牛后肠道菌群的定植贡献,同时研究新生犊牛唾液菌群对犊牛后肠道菌群的定植贡献,分析犊牛唾液和犊牛后肠道菌群结构的动态变化。旨在明确围产期
为了探究活性肽CC34酵母培养物对羔羊氨基酸转运代谢、肠道屏障功能及抗氧化能力的影响。本试验所用羔羊根据单因素完全试验设计原理,将24只24日龄的雄性羔羊（小尾寒羊X东北细毛羊）分为3组,其中对照组（Controlgroup,CON）是不添加任何物质的正常基础日粮,酵母培养物组是添加不含活性肽CC34的酵母工程菌在基础日粮中,活性肽CC34酵母培养物组是添加含活性肽CC34的酵母工程菌在基础日粮中
为探究抗菌肽CC34工程菌粉对育肥羔羊的生长、机体免疫及抗氧化性能和瘤胃及肠道菌群的调控作用,采用单因素完全随机试验设计,选取健康状况良好、体重相近的54只（50±2日龄）雄性单胎未阉割羔羊（小尾寒羊×东北细毛羊）,随机分成3组:空白组（CON组）、抗菌肽CC34×3g组和抗菌肽CC34×6g组,其中对照组（Control group,CON）育肥羔羊饲喂基础饲粮,抗菌肽CC34×3g组（Anti
精子迁移率是测定家禽精子活力的一个重要方法。本研究测定了鹅精子迁移率。比较不同精子迁移率鹅的精子线粒体活性、精子运动参数、精液质量性状的差异。分析不同精子迁移率鹅的睾丸组织结构和生殖激素水平的变化。利用遗传标记,测定了自然交配条件下不同精子迁移率公鹅的个体遗传贡献率,分析了不同精子迁移率组公鹅繁殖效率的差异。挑选来源相同、年龄一致、体况相近、发育良好的40只24月龄籽鹅公鹅单独饲养。分5次对精液进