【摘 要】
：
目的尿源性干细胞（Urine-derived stem cells,USCs）被认为是一类存在于尿液中的间充质干细胞,与生物材料结合应用于膀胱修复与重建有望减少因自体组织或脱细胞基质移植中产生的并发症。本研究通过在尿液环境下将干细胞与材料结合的方法、拟设计一种新型CD29抗体固定化细菌纤维素支架（抗-CD29/BCSs）用来捕获尿液中的USCs,为临床膀胱组织修复提供基础实验依据。方法1.支架制备
论文部分内容阅读
目的尿源性干细胞（Urine-derived stem cells,USCs）被认为是一类存在于尿液中的间充质干细胞,与生物材料结合应用于膀胱修复与重建有望减少因自体组织或脱细胞基质移植中产生的并发症。本研究通过在尿液环境下将干细胞与材料结合的方法、拟设计一种新型CD29抗体固定化细菌纤维素支架（抗-CD29/BCSs）用来捕获尿液中的USCs,为临床膀胱组织修复提供基础实验依据。方法1.支架制备、表征与性能检测。肝素（Heparin,Hep）与Ⅰ型胶原蛋白（Collagen,Col）通过层层自组装和戊二醛交联技术将CD29抗体固定在细菌纤维素（Bacterial cellulose,BC）表面,制得抗-CD29/BCSs。Hep与Col的沉积效果、抗体固定效率与分布状态通过傅立叶变换红外光谱（Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR）、X射线电子光谱（X-ray photoelectron spectroscopy,XPS）和FITC-激光共聚焦显微镜进行检测。人工尿液中对抗-CD29/BCSs进行性能测试,包括溶胀率、降解性、机械强度、抗污性。2.USCs分离、鉴定与细胞活力检测。USCs实现从人尿液样本中分离并使用人尿源性间充质干细胞扩增培养基培养。通过流式细胞术检测USCs表面特异性蛋白表达。钙黄绿素-AM/碘化丙啶双染法观察人工尿液中USCs不同时间的活/死比例。3.人工尿液环境下支架对细胞捕获能力检测。罗丹明-鬼笔环肽与4’,6-二脒基-2-苯基吲哚细胞染色检测人工尿液下抗-CD29/BCSs的USC捕获能力,Image J统计细胞密度、铺展面积与伸长率。4.统计分析。Graphpad Prism 8软件对所得数据进行统计与绘图,单因素方差分析和Tukey检验分析各组之间的差异性。结果1.FTIR与XPS检测证明了所制备支架上包含了BC、Hep与Col的所有重要特征峰,且随着交替沉淀的次数增加,Col覆盖占比面积依次增加。FITC-激光共聚焦显微镜观察到CD29抗体能够均匀地分布在抗-CD29/BCSs表面,人工尿液冲刷下其固定效率无明显差异。所制备支架在人工尿液环境中具有良好的溶胀率、适宜的降解率、机械强度与抗污性,能更好适应膀胱的生理活动。2.从人新鲜尿液样本中分离出米粒样USCs,流式细胞术分析得出间充质干细胞特征性表面标记物呈强阳性表达、造血干细胞与内皮细胞特征性表面标记物呈阴性表达。USCs在人工尿液中1–6 h的存活率逐渐降低,第6 h的细胞存活率为仅55%,因此选择USCs与支架共孵育后的第1、2和4 h为支架捕获检测时间点。3.在人工尿液中抗-CD29/BCSs（抗-CD29/BCSs-U）捕获USCs密度显著高于BC支架（p＜0.001）,与细胞培养基中的抗-CD29/BCSs（抗-CD29/BCSs-M）相比无明显差异。另外,抗-CD29/BCSs-M捕获的USCs相较于抗-CD29/BCSs-U的有更高的细胞伸长率。结论基于捕获支架的物理化学表征、功能测量和生物学评估,抗-CD29/BCSs能够有效在人工尿液中捕获USCs,且USCs一定时间段仍能够有效与支架黏附,满足作为体内膀胱修复载体的生物材料特性。
其他文献
目的:探讨PD-L1表达对胃癌细胞MKN45和SGC7901的迁移、侵袭、粘附等生物学行为的影响,并初步探讨PD-L1表达对上皮间质转化（EMT）相关蛋白及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响。方法:首先采用Western blot和qRT-PCR两种方法鉴定MKN45、SGC7901两种胃癌细胞PD-L1的表达。再利用Western blot和qRT-PCR两种方法对所设计的3种PD
目的1.了解孕前超重和肥胖妊娠期糖尿病（GDM）患者的饮食习惯和饮食结构特点,分析孕前超重和肥胖孕妇发生GDM的危险因素,为指导孕前超重和肥胖GDM孕妇合理饮食提供参考。2.探讨个体化营养治疗对孕前超重和肥胖GDM孕妇的饮食结构、血清学指标、妊娠结局的影响,从而达到使孕前超重和肥胖GDM患者合理膳食、体重适宜增长、降低不良妊娠结局的目的。方法研究一:在2017年12月至2019年12月在青岛大学附
背景:前列腺癌是老年男性最常见的泌尿系统恶性肿瘤,同时也是全球排名前五的肿瘤致死原因。根治性前列腺切除手术是治疗前列腺癌主要且有效的方法之一,但手术后仍有出现切缘阳性的可能,进而影响患者的预后和治疗策略。因此,如能在术前有效辨别术后切缘阳性的危险因素并建立预测模型,根据预测风险的不同提供最合理的治疗方案将为减少术后切缘阳性起到重要作用。既往研究中主要探讨PSA衍生物、穿刺中Gleason评分等与术
目的：系统评价我国老年糖尿病患者认知衰弱（cognitive frailty，CF）的患病率及影响因素。方法：计算机检索PubMed、Embase、Web of Science、CINAHL、Cochrane Library、中国知网、万方、中国生物医学数据库中有关老年糖尿病患者CF患病率及影响因素的横断面研究，检索时限为建库至2022年11月1日。对符合标准的文献进行质量评价和数据提取，采用R4
“影响酶活性的条件”是新人教版高中生物学必修1中的一个重要探究实验，其中探究温度对酶活性的影响大多以定性研究的方式呈现。针对定性实验的不足，可鼓励学生把定性实验拓展为定量实验，即摒弃传统的检测淀粉剩余量的方法，避开检测试剂的选择，创新性地使用糖度计检测淀粉被酶分解后产物的生成量，据此定量判断唾液淀粉酶的活性，具有操作简单、方法有效和结果真实的优点。
目的探讨睡眠障碍与精神疾病的共病情况,以及分析容易被误诊为精神疾病的睡眠障碍并进行综述。方法研究相关的资料主要来源于检索Pubmed数据库,MEDLINE（2020年1月前）,PsycINFO（2020年1月前）,中国知网和万方数据库（2020年1月前）等数据库。研究显示:睡眠障碍与精神疾病密切相关。睡眠紊乱是许多精神疾病常见的伴随症状,睡眠问题往往是驱使患者主动求医的主要原因。睡眠医学与精神医学
通过文献调查、实验探究等方法研究分析高温条件下淀粉和淀粉酶混合液遇碘不变蓝的原因,发现其主要与淀粉、I2-KI溶液体系的可逆热色性有关,其次也与淀粉本身具有的弱还原性有关,最后给出“温度对酶活性影响”实验设计的改进建议。
目的:应用高糖处理的人角膜内皮细胞（Human corneal endothelial cells,HCECs）和链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）诱导的Ⅰ型糖尿病小鼠模型,探讨谷氨酰胺（Glutamine,Gln）对糖尿病角膜内皮细胞的作用及机制。方法:1.高效液相色谱-串联质谱检测年龄相关性白内障和糖尿病性白内障患者房水中神经递质类物质的含量;谷氨酰胺试剂盒检测正常小鼠和糖尿病
目的:探讨胸大肌筋膜瓣联合侧胸壁筋膜瓣覆盖假体对比补片覆盖假体在即刻乳房重建中的应用价值。比较两种覆盖假体的手术方式、术后并发症、患者满意度与就医费用,为乳腺癌即刻重建患者选择手术方式提供参考。方法:回顾临沂市肿瘤医院乳腺科2018年1月到2021年12月假体乳房重建病例,纳入采用部分胸大肌筋膜瓣联合侧胸壁筋膜瓣覆盖假体外下极（A组）以及采用钛化物聚丙烯修补网（titanium-coated po
目的心血管疾病是造成人类死亡的主要因素之一,其中,心力衰竭是最主要的致死原因。心力衰竭的病理在于心肌梗死引发心肌功能细胞的大量丧失。多年来,心脏能量来源线粒体功能的损伤被认为是心力衰竭的关键分子机制。随着研究的深入,人们认识到线粒体功能不仅限于提供能量,还参与重要的生化和调控过程,包括氧化还原、生物合成、活性氧信号、细胞生长和死亡、离子稳态、蛋白质折叠和炎症等。由此可见,线粒体不仅作为能量来源参与