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目的与背景：乳腺癌现已成为严重威胁全球女性生命健康的主要恶性肿瘤之一。其发病率呈现一个非常明显的上升趋势，年增长率2％至3％，近几年在发展中国家更为明显。据美国癌症协会估计，2012年美国确诊的乳腺癌新发病例226,870例，死于乳腺癌的患者39,510例。术后复发转移是乳腺癌患者死亡的主要原因。近几年由于先进的诊断仪器和规范化系统治疗的发展及普及，复发转移早诊率提高，患者的生存时间延长，死亡风险下降。因此，探讨乳腺癌复发、转移的危险因素及干预措施是降低乳腺癌死亡率的重要措施之一。中心体蛋白Nlp（ninein-like protein）是γ-微管蛋白复合物结合蛋白（GTBPs）的一员，是有丝分裂过程中必不可少的成分。Nlp的主要功能是促进微管成核，从而促进中心体成熟、纺锤体形成和染色体分离。几乎所有的肿瘤和肿瘤来源细胞的中心体都在形态、构成及功能上出现异常。中心体的异常改变会导致细胞周期的中断，包括染色体不分离和多核表型，而这有可能会导致细胞转化异常、肿瘤形成和恶性程度的发展。几乎所有的的肿瘤及肿瘤来源的细胞的中心体在形态及组成上存在异常扩增的现象，且有报道中心体异常存在于较低级别的肿瘤中，并且在侵袭性恶性肿瘤中逐渐增加。在晚期、复发的恶性肿瘤及具有侵袭能力的肿瘤细胞中，具有显著的中心体异常改变。因此，中心体蛋白Nlp可能在乳腺癌的发生、发展及转移侵袭的过程中起到重要作用。本研究通过慢病毒基因转染、蛋白质免疫印迹检测技术（Western blotting）、MTT法、克隆形成及基因谱测序等细胞生物学技术，探讨中心体蛋白Nlp对乳腺癌的生长增殖能力及侵袭转移能力的影响。方法：应用PUBMED检索NLP基因序列，NM025176，采用人工构建pEGFP-C1-NLP质粒，同时以pEGFP-C1空载质粒作为对照，利用慢病毒转染技术将pEGFP-C1-NLP质粒及pEGFP-C1空载质粒稳定转染到乳腺癌细胞系MCF-7中，分别构建过度表达NLP的MCF7-GFP-NLP细胞及表达空载质粒的MCF-7-GFP细胞，应用RT-PCR技术及Western blot法鉴定转然后乳腺癌MCF-7细胞中Nlp的mRNA及蛋白水平的表达。应用流式细胞仪检测转染后细胞周期的变化。应用MTT比色法、克隆形成实验、Transwall侵袭小室的方法，比较MCF7-GFP-Nlp细胞与MCF7-GFP细胞系在增殖、侵袭转移潜能的差异。并应用Western blot法检测转移相关蛋白CXCR4（细胞趋化因子受体4）在MCF7-GFP-NLP细胞及MCF-7-GFP细胞中表达水平的改变状况。对MCF7-GFP-Nlp细胞与MCF7-GFP细胞进行基因表达谱测序，筛选出差异基因。结果：与MCF7-GFP细胞相比，MCF7-GFP-Nlp细胞的生长加快（P＜0.05），MCF7-GFP-Nlp细胞与MCF7-GFP细胞克隆形成数目分别为：206±14.35，49±3.45，克隆形成率显著上升（P＜0.05）。MCF7-GFP-Nlp细胞与MCF7-GFP细胞迁移至膜下的数目分别为:878±18.22，398±8.02，与MCF7-GFP细胞相比，MCF7-GFP-Nlp细胞的迁移能力显著增强（P＜0.05）。应用Western blotting检测结果显示MCF7-GFP-Nlp细胞高表达CXCR4。差异基因表达谱测序结果，按照筛选标准共选择出206个差异基因：与MCF7-GFP细胞相比，MCF7-GFP-Nlp细胞中上调基因46个，下调基因160个。结论：细胞中Nlp高表达与乳腺癌细胞MCF-7细胞的增殖、侵袭转移能力增加有关，提示Nlp促进乳腺癌的进展，是预测乳腺癌转移及指导治疗的潜在生物学指标。