钻井废弃泥浆降解菌的分离及特性研究

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从四川不同井场采集钻井废弃泥浆,采用稀释平板法,分离获得了15株细菌,对其生物学特性、系统发育、泥浆降解能力进行了研究。结果如下:(1)按5%浓度接种供试菌株至400ml泥浆,28℃曝气处理48 h,测定上清液OD和CODcr去除率,按照色度和CODcr去除率高低,获得了C-2-3,C-3-1,C-5-2,C-7-2,C-7-4和C-8-2等6个优良降解菌。(2)生理生化试验结果表明,除菌株C-2-3和C-7-2外,其他4个菌株能够在初始pH6.0和pH10.0范围生长,供试菌株对碱的耐受性强;供试菌株最适生长温度为28℃,能在37℃下生长,菌株C-2-3、C-3-1、C-7-2、C-7-4和C-8-2能在7℃正常生长。(3)选取C-5-2为代表菌株,分别添加2.5g/L,5 g/L,10g/L,15g/L,30g/L和50g/L灭菌泥浆为惟一碳源,接种培养3d,供试菌株生长良好。在添加50g/L泥浆的培养基中培养3d。结果表明,供试菌株C-5-2的数量达73.76×108 cfu/mL,显然,C-5-2能很好地利用泥浆中大分子有机物为惟一碳源。(4)继而,探讨了供试菌株对废弃钻井泥浆CODcr降解情况,结果表明,供试菌株对钻井废弃泥浆CODcr有良好的去除效果。处理48h后,所有接种供试菌株处理,泥浆CODcr由89864.6 mg/L降至20000 mg/L左右,CODcr去除率达到85%-90%。尤以接种混合菌株和C-7-2处理48h后,泥浆CODcr去除率最高,达到95.2%。(5)在自然pH和pH 7.0条件下,菌株对色度去除率随pH不同而异。自然pH条件下,菌株C-2-3,C-7-2和C-7-4对泥浆的色度去除率高于调节pH处理;而菌株C-3-1,C-5-2和C-8-2对泥浆的色度去除率,则呈现调节pH处理高于自然pH处理。(6)对供试15株泥浆降解菌的进行了数值分类分析,结果表明,供试菌株在80%相似性水平被分为6个表观群。进而测定了5个代表菌株16S rDNA序列,构建了16S rDNA系统发育树状图。结果表明,菌株C-2-3,C-7-2和C-8-2与H. ventosaeAl12T位于同一系统发育分支,C-2-3与H. ventosae Al12T序列相似性为98.3%;C-3-1同参比菌株H. campaniensis 5AGT的序列相似最高,为95.4%。这些菌株很可能代表了盐单孢菌属的两个新种群。
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