生防木霉菌株防治番茄叶霉病的研究

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木霉菌Trichoderma spp.属于半知菌亚门丛梗孢科真菌,常见于土壤中,对18个属29种病原真菌表现出拮抗作用。本研究采用平板对峙与盆栽试验相结合的手段,研究木霉菌株 T28对番茄叶霉病的防治效果及机理。主要研究结果如下:  对峙培养结果显示:T28菌株对叶霉病菌有明显的抑制作用,T28菌株在与病原菌的对峙中,不仅形成对抗局面,并且 T28菌株较病原菌快速占据营养空间,覆盖了病原菌区域,最终病原菌菌落逐渐消减。T28菌株对番茄灰霉病的抑菌率在第5d为61.89%,拮抗系数为Ⅱ级。木霉菌对番茄叶霉病的拮抗作用表现为较强的重寄生作用,其释放的代谢产物可消解叶霉菌菌丝。显微观察发现,木霉菌菌丝缠绕于叶霉病原菌菌丝上生长,使菌丝形状发生变化,并逐渐断裂、消解。  室内防效试验结果表明:不同浓度木霉菌孢子悬浮液均对番茄叶霉病具有明显的防治效果,木霉孢子悬浮液、稀释10倍孢子悬浮液、稀释50倍孢子悬浮液对接种叶霉病孢子悬浮液和灰霉病菌饼的防效分别达34.78%、55.61%,38.76%、56.90%,32.05%、49.74%。与对照相比,接种木霉处理 CAT和 POD活性均显著提高。只喷病原菌孢子悬浮液处理的膜脂过氧化产物 MDA含量显著高于对照,而预接种木霉孢子悬浮液的处理膜脂过氧化产物 MDA含量较低,表明接种木霉能有效提高植株的抗氧化酶水平,降低脂质过氧化程度,从而有效提高对叶霉病的抗性。  木霉处理显著提高了 AsA-GSH途径相关酶活性。与只接种叶霉病菌相比,预接种木霉对各种酶活性的诱导作用更为明显, GR、DHAR、G6PDH、6GPDH、NADP-ICDH以及 NADP-ME活性分别较只接种处理提高59.72%、23.10%、19.71%、21.22%、32.77%和7.78%。  接种叶霉菌导致了番茄叶片净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、Fv/Fm和qP均显著下降,分别较对照降低了40.39%、58.46%、43.21%和62.30%。与之相反,胞间 CO2(Ci)浓度和 Y(NPQ)则明显上升。接种木霉则显著提高了番茄的光合速率 Pn和最大光化学效率 Fv/Fm。与只接种病原菌孢子悬浮液相比,预接种木霉孢子悬浮液 Pn、Gs、Fv/Fm和 qP分别提高了60.88%、92.59%、63.04%和82.61%。  与对照相比,接种木霉和叶霉病菌后番茄 DNA含量发生了显著的变化。与对照相比,接种枯萎病菌后,2C的比例显著降低了20.18%,同时8C的比例显著增加了40.95%,而4C的比例没有显著变化。而与只接种叶霉病菌相比,预接种木霉则可提高了2C的比例,降低了8C的比例,从而缓解了叶霉病对细胞周期的影响。接种叶霉病菌后,番茄叶片细胞周期相关基因的表达量均明显低于对照植株。而接种木霉菌1 d即激活了各个细胞周期基因的表达。预接种木霉T28再接种叶霉处理,CDKA, CDKB, CycA, CycB, CycD3;1andCycD3;2基因的表达量分别是只接种叶霉病菌的2.39,3.58,7.64,5.81,1.98和3.43倍  接种叶霉病显著降低气孔的开度。随着接种时间延长,进一步降低了气孔孔径大小,当处理第8d时几乎完全抑制了气孔在光照下的开放。而预接种木霉可以缓解叶霉病造成的气孔关闭,第8d时光照下气孔孔径的大小较只接种叶霉病处理104.4%。  综上,接种木霉可有效提高植株的抗氧化酶及 AsA-GSH途径相关酶活性,降低脂质过氧化程度,调节了叶片 DNA相对含量和细胞周期相关基因表达,增强了光合速率 Pn和最大光化学效率 Fv/Fm,缓解了气孔关闭,从而有效提高对叶霉病的抗性。
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