水稻条纹病毒(Rice stripe tenuivirus,RSV)属于纤细病毒属,是水稻条纹叶枯病的病因。灰飞虱是RSV传播的主要昆虫,其一旦获毒便长久携带并传播,RSV在灰飞虱中以循回增殖方式进行传播,给病害防治带来困难,而且一旦流行爆发,会造成大范围的水稻减产甚至绝收。开展RSV的研究有助于促进水稻条纹叶枯病的防治工作。RSV基因组可以编码7种蛋白,其中对于Pc2蛋白的相关研究报道较少,Pc2的N端多肽(Pc2-N)可以在介体灰飞虱和感病植株中检测到,说明其可能在灰飞虱传播病毒和引起水稻感病的过程中起作用。本文就介体灰飞虱内与Pc2互作的蛋白相关方向开展研究工作。本文通过酵母双杂交技术筛选了与RSV Pc2互作的介体灰飞虱蛋白。在构建了酵母双杂交核系统和分离泛素酵母双杂交系统所需的诱饵载体和灰飞虱cDNA文库的基础上。经过酵母双杂交核系统筛选获得7个可能互作的蛋白,从中选择灰飞虱肌动蛋白1(LsAT1)进行深入分析;经过分离泛素酵母双杂交系统筛选获得3个可能互作的蛋白,从中选择灰飞虱糖转运蛋白1(LsST1)和灰飞虱热激蛋白(LsHSC70)进行深入的分析。然后分别扩增了这三个基因的全长序列,进行跨膜区和信号肽的分析,结果表明灰飞虱糖转运蛋白1(LsST1)存在12个跨膜区,灰飞虱肌动蛋白1(LsAT1)和灰飞虱热激蛋白(LsHSC70)均不存在跨膜区,进而通过双分子荧光互补和免疫共沉淀对可能互作蛋白进行验证,结果证明了 Pc2-N和LsAT1,Pc2-M2N和LsST1有相互作用,Pc2-M2N和LsHSC70有很大的相互作用可能性。最后利用亚细胞定位分析了互作蛋白在细胞内的分布位置,发现Pc2-N和LsAT1,Pc2-M2N和LsST1,Pc2-M2N和LsHSC70有共定位现象,并且发现LsST1可能改变Pc2的定位,而且在LsST1表达量少或者不表达的地方,Pc2-M2N表达偏多。表明它们在RSV的介体传播过程中起到一定的作用,这些结果为深入研究病毒传播机制打下了坚实的基础。