【摘 要】
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microRNA (miRNA)是一类长度约22nt的小分子单链RNA,在生物体中广泛存在并在各种生理过程中起重要的调控作用。在不同生物中,通过大规模高通量文库筛选和微阵列研究至今已在
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microRNA (miRNA)是一类长度约22nt的小分子单链RNA,在生物体中广泛存在并在各种生理过程中起重要的调控作用。在不同生物中,通过大规模高通量文库筛选和微阵列研究至今已在不同生物中发现众多miRNA家族成员,但对其功能研究相对有限,尤其是miRNA对雄性生殖细胞发育调控方面报道更少。在本研究中,我们集中对小鼠X染色体连锁的miR-471进行了初步的功能研究。我们发现miR-471在小鼠睾丸中的表达模式随时序变化,即在10天左右达到一个较高水平,在15天前后急剧下降,在成年期维持中等表达水平；我们通过PCR克隆构建了miR-471表达质粒,并利用3T3细胞的瞬时表达证明了这一表达系统的有效性。通过筛选稳定表达细胞株,我们发现miR-471过量表达能够显著促进细胞增殖；利用本实验室已经建立的小鼠精原干细胞(SSC)体外培养体系,我们发现miR-471体外转基因系统也能够促进SSC的体外增殖。上述实验结果提示miR-471可能在小鼠SSC增殖过程中起调控作用,为进一步研究miR-471的功能奠定基础,以及为研究其他小鼠睾丸特异性1miRNA的功能提供重要参考。
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