生物体内几乎所有细胞都受多肽调节,如：细胞分化、神经激素递质调节、免疫调节等,多肽具有调节机体生理功能和提供机体营养的双重功效,因此多肽药物和保健品的研究和开发具有重要的研究意义和应用前景。人们可以利用生物体内分离、生物技术及化学合成等方法获得多种活性肽,尤其是化学合成过程中能够方便改变多肽的一级结构、加入特殊氨基酸、对多肽末端进行修饰等优点,因此本文使用化学合成方法制备了几种活性肽,并对制备方法、分离纯化、鉴定技术及生物免疫应用进行了初步研究,具体内容如下：1、多肽F1-23(QVKLEESGGGLVQAGDSLRVSC A)和多肽AA12(CERVIGTGWVRC)的合成、纯化及表征采用BOC合成法制备F1-23多肽,对其合成条件进行了优化,尤其对缩合剂和树脂种类进行了优化,实验结果表明缩合剂HCTU和HBTU缩合效率类似,获得多肽混合物分别用HPLC进行分离纯化,后者的分离度较高,所以选择HBTU缩合剂有利于多肽的分离纯化。采用Boc-和Fmoc-两种合成方法得到多肽AA12,在多肽的合成过程中,由于后者避免了强酸处理过程,减少了多肽从树脂上脱落的损失,同时提高了色氨酸的稳定性,实验结果表明使用Fmoc方法有利于多肽AA12的合成。另外,从实验的可操作性和复杂性等方面考虑,使用Fmoc-合成方法适合此类多肽的合成。2、两个光敏多肽的合成、表征及其光解效率的研究首先合成了Fmoc保护氨基的非天然光敏氨基酸Fmoc-3-氨基-3-(2-硝基苯基)-丙酸[3-amino-3-(2-nitrophenyl)propionic acid],采用圆二色谱(circular dichroism spectrum, CD)法和旋光仪对其进行表征,初步证明了合成的非天然光敏氨基酸为外消旋的对映异构体。通过合成两个光敏多肽,分析了光照对不同位置的非天然光敏氨基酸组成的多肽裂解效率的影响,以及光照时间对光裂解的影响。实验结果表明：光照2小时后光解率为86.12%,可以得出当光敏氨基酸位于多肽KILGFVFTV的第四个位置时,更容易发生光解。该多肽将用于络合MHCI分子,进行特异的免疫T细胞识别,为生物免疫分析提供有力工具,减少一些生物复性和纯化的时间。3、利用光敏作用纯化多肽方法的初步研究利用半胱氨酸巯基与金纳米颗粒的很强的吸附作用来纯化多肽。首先合成含有巯基和溴基团的光敏半胱氨酸衍生物,利用溴基团通过缩合作用与多肽连接,并对其进行裂解,获得混合多肽。因为合成过程中,每一步使用乙酸酐和吡啶封闭未反应的氨基,所以只有目标多肽会通过半胱氨酸的巯基与纳米金作用。通过高速离心的方法,将多肽与纳米金的复合物与其它杂质分离。然后使用紫外光照射,获得纯化的多肽。该方法适用于任何氨基酸序列构成的多肽,具有分离纯化多肽的普适性,为多肽的分离纯化提供一种新方法及新思路。