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目的：利用虚拟筛选结合活性实验，发现全新结构且具有较高活性和选择性的A2A受体小分子拮抗剂，并初步探讨拮抗剂在大鼠僵住症模型上的效果。 方法：培养A2A受体稳定转染的HEK293细胞，收集细胞后匀浆裂解，低速离心去除核及未裂解的细胞，超高速离心收集细胞质膜成分，测定浓度后取50~70μg/管采用放射性配基结合实验法测定；同样，培养A1受体稳定转染的HEK293细胞，同法收集细胞质膜成分，测定浓度后取30~50μg/管测定；筛选时，先用100μM化合物初筛，初筛使用两副孔，重复一次。初筛后选择抑制率大于80％的化合物进行复筛，复筛做化合物浓度-特异性结合曲线，化合物浓度范围为100μM~1nM/0.1nM，每浓度使用两副孔，从曲线中通过GraphPad Prism计算得到Ki及IC50，重复一次。通过放射性配基结合实验筛选，确认对A2A具有亲和力，且相对于A1而言有选择性的化合物，进行细胞的功能性评价。功能性评价选用离心收集的A2A-HEK-293活细胞，将终浓度范围为100μM~1 nM/0.1 nM的化合物，加入激动剂预先处理的平衡缓冲液混悬的细胞中，通过测定cAMP来确证其拮抗活性。最后，优选活性较好的A2A受体小分子拮抗剂进行体内动物实验，使用氟哌啶醇诱导的僵直大鼠来进行小分子拮抗剂的体内抗PD作用的研究。 结果：在第一批次筛选的化合物中，选取两个Ki小于1μM的化合物进行功能及抗PD活性测定，证明其A2A受体拮抗活性及抗PD活性良好；在此基础上，再选取这两个化合物的32个同系物，进行亲和力测定，其中有一个化合物Ki达到54±3 nM，且具有选择性（fold<0.1）。 结论：利用虚拟筛选结合活性实验，发现了全新结构且具有较高活性（Ki=54±3 nM）和专一性（fold<0.1）的A2A受体小分子拮抗剂。