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目的:电能作为一种清洁高效的能源,在人们生产生活中扮演着不可替代的角色。然而电力在给人们带来方便的同时,电烧伤给人们带来的伤害也不容忽视。特别是高压电烧伤,具有病理机制复杂、对机体影响广泛、并发症多等特点。因此高压电烧伤的治疗一直以来都是困扰临床医生的一个难题。设计本实验的目的就是为临床治疗提供一些参考资料,为高压电烧伤患者的康复略尽绵薄之力。通常,高压电流进入机体,将沿电阻较小的血管走行,这一过程将造成血管壁损伤,胶原暴露,血小板激活,血小板表面膜糖蛋白结构发生变化,导致血小板发生粘附、聚集、释放等动作,产生微血栓。前期试验已证明高压电烧伤可使大鼠机体小板膜糖蛋白GPⅠb/Ⅸ/Ⅳ表达量降低、GPⅡb/Ⅲa的表达量升高,血小板激活,血栓形成,血流缓慢,微循环障碍。己酮可可碱可降低血小板活化程度,改善微循环障碍。本次试验通过建立高压电击伤大鼠实验模型,进一步观察高压电流对血小板膜糖蛋白GPⅠa/Ⅱa及GPⅣ的影响及己酮可可碱(PTX)、乌司他丁(UTI)对其干预效果。方法:1实验动物分组:将健康成年雄性SD大鼠(河北医科大学实验动物中心提供体重250-300g,证书编号:1411023)240只,应用随机数表,根据随机区组设计法将其中的240只平均分成四组,空白对照组,高压电击组、治疗组1(乌司他丁组)、治疗组2(己酮可可碱组),每组60只。再在每组中随机分为电前15min(T0)、电后15min(T1)、电后1h(T2)、电后2h(T3)、电后4h(T4)、电后8h(T5),6个不同时相组,每组10只。各组分别编号,分笼饲养。2实验前准备:按实验要求,配置所需药品,将大鼠称重、标号,按顺序记录数据。3高压电烧伤大鼠模型制备:连接好实验设备,待用。用水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉大鼠,麻醉成功后,将大鼠仰卧于电击实验台上,左上肢及右下肢分别连接1cm×1cm电极片,左上肢为入口,右下肢为出口。连接电源,调整电压为2k V,闭合实验仪器回路,使大鼠经受高压电击3s。按照实验要求,空白对照组只连电极片,给与假电,及生理盐水5ml/kg;高压电击组电后给与生理盐水5ml/kg;治疗组1电后给与UTI,2万单位/kg;治疗组2电后给与1%PTX,5ml/kg。以上各组分别按时相取血,制备血清。4标本采集与保存:按照时相,将高压电烧伤大鼠麻醉(水合氯醛0.3ml/100g)、固定于动物手术台上、开胸、直视下心尖取血(3ml粉头促凝管)。每只大鼠收集约6ml全血,静置约30min,待血清析出后,用离心机以3000转/min离心约10min,取上层血清,置于2ml Eppendorf管中,保存于-70℃冰箱中,待检。5指标检测:采用ELISA双抗夹心法,分别检测五组大鼠六个时相血清血小板膜糖蛋白GPⅠa/Ⅱa及GPⅣ的表达量的OD值,根据试剂盒说明将OD值换算成浓度值。6实验数据处理:采用SPSS13.0统计软件对所得数据进行分析整理。实验数据均采用均数±标准差(x±s)表示。采用两因素析因设计的方差分析,多重比较采用LSD-t检验,设定P<0.05为显著性差异。结果:1血清GPⅠa/Ⅱa变化1.1电伤组大鼠血清GPⅠa/Ⅱa总体含量高于空白对照组(P<0.01),且GPⅠa/Ⅱa含量随伤后时间变化具有显著差异(P<0.01),呈先增高后降低趋势,在伤后2h达到高峰,随后下降,但在8h时仍高于空白对照组(P<0.01)。1.2乌司他丁组大鼠血清GPⅠa/Ⅱa总体含量低于电伤组(P<0.01),且乌司他丁组GPⅠa/Ⅱa含量在电伤后逐渐升高,在伤后2h达到高峰,以后逐渐下降,伤后15min~8h均低于电伤组,有显著差别(P<0.05)。1.3己酮可可碱组大鼠血清GPⅠa/Ⅱa含量总体低于电伤组(P<0.01),且己酮可可碱血清GPⅠa/Ⅱa含量在电伤后变化较为复杂。电伤后15min~8h均低于电伤组,有显著差别(P<0.05)。2血浆GPⅣ变化2.1电伤组大鼠血清GPⅣ总体含量高于空白对照组(P<0.01),且GPⅣ含量随伤后时间变化具有显著差异(P<0.01),呈先增高后降低趋势,在伤后2h达到高峰,随后下降,但在伤后8h时仍高于空白对照组(P<0.01)。2.2乌司他丁组大鼠血清GPⅣ总体含量低于高压电伤组(P<0.01),且乌司他丁组GPⅣ含量在电伤后逐渐升高,在伤后2h达到高峰,以后逐渐下降。电伤后15min~8h均低于电伤组,有显著差别(P<0.01)。2.3己酮可可碱组大鼠血清GPⅣ含量总体低于电伤组(P<0.01),且己酮可可碱组血清GPⅣ含量在电伤后变化较为复杂。伤后15min~伤后2h低于电伤组(P<0.01),有显著差异,在伤后4h与电伤组无显著差异(P<0.05),在伤后8h低于电伤组,有显著差异(P<0.05)。结论:1高压电烧伤后血清GPⅠa/Ⅱa和GPⅣ均有不同程度增高,证明高压烧伤可引起血小板活化,促进血栓形成,使机体处于高凝状态。2高压电烧伤治疗组1(UTI)GPⅠa/Ⅱa及GPⅣ血清含量较高压电击组低,提示UTI可帮助降低电烧伤后GPⅠa/Ⅱa及GPⅣ水平,改善血液高凝状态,防止血栓形成;高压电烧伤治疗组2(PTX)GPⅠa/Ⅱa及GPⅣ血清含量较高压电击组低,提示PTX可帮助降低电烧伤后GPⅠa/Ⅱa及GPⅣ水平,改善血液高凝状态,使血液粘度降低,防止血栓形成。