雷丸化学成分及药理作用的研究

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本论文对雷丸Omphalia lapidescens菌核化学成分、抗氧化和体外抑菌活性方面进行了研究。化学成分方面,对粉碎的雷丸进行回流提取,通过薄层层析、硅胶柱层析对雷丸石油醚层提取物的化学成分进行了系统分离,共得到6个单体化合物,并运用13C-NMR核磁共振光谱、1H-NMR核磁共振光谱、经电子轰击质谱(MS)等手段进行了鉴定,分别为苯甲酸丁酯、4,6,8(14),22(23)-四烯-3-酮-麦角甾烷、麦角甾-7,22-二稀-3p-醇、麦角甾-5,7,22-三稀-3β-醇、麦角甾醇、麦角甾醇过氧化物。其中苯甲酸丁酯、4,6,8(14),22(23)-四烯-3-酮-麦角甾烷、麦角甾-7,22-二稀-3p-醇、麦角甾-5,7,22-三稀-3p-醇为首次从雷丸菌核中分离得到。对雷丸石油醚提取物进行GC-MS分析。抗氧化活性方面,通过建立体外二苯基苦味酰基苯肼自由基(·DPPH)和羟自由基(·OH)发生体系,研究了雷丸提取物的对自由基的清除作用。通过DPPH法,邻二氮菲-Fe2+氧化法对雷丸菌核提取物清除自由基的活性进行了研究。结果表明,当浓度达到2mg/mL时,乙酸乙酯提取物清除自由基的活性最强,对DPPH自由基和-OH自由基的清除率分别达到97.15%和98.69%;其次是甲醇提取物,当浓度达到2m/mL时,对DPPH自由基和.OH自由基的清除率分别达到96.15%和77.83%;再次是氯仿提取物,当浓度达到2mg/mL时,对DPPH自由基和·OH自由基的清除率分别达到67.61%和62.86%;石油醚提取物清除自由基活性最低,当浓度为2m/mL时,对DPPH自由基和-OH自由基的清除率分别为20.07%和21.24%。体外抑菌活性方面,雷丸菌核经回流提取得到的各提取物,采用纸片扩散法进行体外抑菌活性研究,由试验数据统计可知在抑制大肠杆菌ATCC8099生长方面,雷丸菌核不同提取物有着不同的抑制作用。其中,乙酸乙酯提取物的抑制作用最好,当浓度为50mg/mL时,抑制率可达到94.68%;其次为氯仿提取物,当浓度为50mg/mL时,抑制率为76.78%;再次为丙酮提取物和石油醚提取物,当浓度为50mg/mL时,抑制率分别为61.72%和46.09%;再次为甲醇提取物,当浓度为50mg/mL时,抑制率仅为19.54%;水提取物对大肠杆菌ATCC8099的生长没有抑制作用。此外,当化合物2浓度为2×10-2mg/mL时,抑制率为16.36%,当化合物3和化合物4浓度为2×10-2mg/mL和1×10-2mg/mL时,对大肠杆菌ATCC8099没有有抑制作用。在抑制金黄色葡萄球菌ATCC6538生长方面乙酸乙酯提取物的抑制作用最好,当浓度为50mg/mL时,抑制率可达到61.59%;其次为丙酮提取物和氯仿提取物,当浓度为50mg/mL时,抑制率分别可达到52.27%和48.61%;石油醚提取物和甲醇提取物抑菌作用较弱,当浓度为50mg/mL时,抑制率分别可达到14.03%和20.38%;水提取物对金黄色葡萄球菌ATCC6538没有抑制作用。此外,当化合物2浓度为2×10-2mg/mL时,对金黄色葡萄球菌ATCC6538有抑制作用,为23.29%。当化合物3和化合物4浓度为2×10-2mg/mL和1×10-2mg/mL时,对金黄色葡萄球菌ATCC6538没有有抑制作用。在抑制枯草芽孢杆菌ACCC11060生长方面,石油醚提取物的抑制作用最好,当浓度为50mg/mL时,抑制率可达到56.09%;其次为氯仿提取物和乙酸乙酯提取物,当浓度为50mg/mL时,抑制率分别可达到30.98%,20.54%;丙酮提取物和甲醇提取物有较弱的抑菌作用,当浓度为50mg/mL时,抑菌率分别仅为9.55%和8.07%;水提取物对枯草芽孢杆菌ACCC11060的生长没有抑制作用。此外,当化合物2浓度为2×10-1mg/mL时,对枯草芽孢杆菌ACCC11060有抑制作用,为15.09%。当化合物3和化合物4浓度为2×10-2mg/mL和1×10-2mg/mL时,对枯草芽孢杆菌ACCC11060没有有抑制作用。在抑制白色念珠菌JLC31680生长方面,乙酸乙酯提取物的抑制作用最好,当浓度为50mg/mL时,抑制率可达到57.51%;其次为氯仿提取物和石油醚提取物,当浓度为50mg/mL时,抑制率分别可达到52.46%和30.55%;丙酮提取物和甲醇提取物抑菌作用较弱,当浓度为50mg/mL时,抑制率分别可达到28.27%和15%;水提取物对白色念珠菌JLC31680没有抑制作用。此外,当化合物2化合物3和化合物4在浓度为2×10-2mg/mL和1×10-2mg/mL时,对白色念珠菌JLC31680没有抑菌作用。在抑制白色念珠菌JLC31681生长方面,乙酸乙酯提取物和丙酮提取的抑菌活性接近,当浓度为50mg/mL时,抑制率分别可达到21.39%和18.30%;而石油醚提取物、氯仿提取物、甲醇提取物和水提取物对白色念珠菌JLC31681无抑制作用。此外,当化合物2、化合物3和化合物4在浓度为2×10-2mg/mL和1×10-2mg/mL时,对白色念珠菌JLC31681没有抑菌作用。
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