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树突状细胞(dendritic cells,DCs)是唯一可以诱导初始型T细胞(naive T cell)活化的专职抗原递呈细胞(APC),未成熟DCs(iDCs)能够维持外周耐受,而成熟DCs(mDCs)能够刺激效应性T细胞。DCs能分泌一种直径约为30-100 nm的微小膜囊泡体(exosomes),称Dex,表达一些与DCs功能相关的分子,如MHC-Ⅰ、Ⅱ类分子、共刺激分子B7以及黏附分子CD54等,Dex的功能取决于其来源细胞类型及其成熟的状态。为了探讨树突状细胞(DCs)分泌的exosomes(Dex)诱导T细胞免疫耐受作用,研究供体Dex降低同种异体移植排斥的可能性。体外诱导和培养正常人外周血单个核细胞来源的iDCs,并负载其自身冻融抗原,用lipopolysaccharide(LPS)促其成熟,流式检测iDCs和mDCs的表型;采用超速离心和超滤的方法分离纯化iDCs分泌的Dex(iDex)和mDCs分泌的Dex(mDex);以混合淋巴细胞反应(MLR)作为同种异体移植体外模型,CCK-8法比较iDex和mDex的生物学功能。结果显示,异源的iDex在iDCs存在时能够抑制MLR中T细胞增殖反应,而异源的mDex在mDCs存在时则增强MLR中T细胞增殖反应。因此mDCs来源的mDex,能够活化T细胞产生免疫应答,在抗肿瘤免疫治疗中具有诱人的前景;相反iDCs来源的iDex可以诱导外周免疫耐受,在同种异体移植耐受中起重要作用,将成为防止移植排斥反应以及治疗自身免疫性疾病的一种新方法。同时,为了进一步研究调节性DCs分泌的rDex诱导的免疫耐受作用途径和分子机制,为抗肿瘤,预防移植排斥,治疗自身免疫性疾病等临床应用提供理论基础,用TGF-β1联合IL-10诱导调节性DCs,流式细胞仪检测调节性DCs和正常DCs的表面标志及吞噬功能,并用Bradford法检测它们分泌Dex的能力;Western-Blot方法检测并比较iDCs分泌的Dex(iDex)与调节性DCs分泌的Dex(rDex)表达的相关分子;通过CCK-8法分析异源iDex和rDex在MLR中抑制T细胞增殖作用的效果,比较rDex与iDex诱导免疫耐受的能力。结果显示,TGF-β1和IL-10可下调DCs表面的共刺激分子CD80、CD83、CD86的表达,并诱导调节性DCs分泌更多的rDex;rDex抑制T细胞增殖作用显著强于iDex;rDex表达更多的FasL,提示TGF-β1和IL-10诱导的调节性DCs分泌的rDex在免疫耐受中发挥重要作用,有望应用于同种异体移植抗免疫排斥反应。