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本文应用基因克隆、免疫中和、酶免疫测定、放射免疫测定等技术，构建含CpG基序的生长抑素表达质粒pES／2SS-CpG，并以pES／2SS、pES／2SS-CpG、pES／2SS+pE-CpG免疫小鼠，分析CpG序列协同生长抑素基因免疫对免疫应答、淋巴细胞增殖和相关激素水平的影响，旨在研究如何利用CpG来作为有效的生长抑素基因疫苗分子佐剂。主要内容如下： 1．含CpG的生长抑素基因新疫苗pES／2SS-CpG的构建与鉴定 设计并化学合成两条含有8个CpG基序的CpG-ODN，95℃退火成双链，插入到质粒pES／2SS中，酶切和测序鉴定证实成功构建了生长抑素基因疫苗pES／2SS-CpG，为利用分子佐剂提高生长抑素基因免疫效果奠定基础。 2．含CpG生长抑素基因疫苗免疫小鼠引起的体液免疫和细胞免疫应答 40只小鼠随机分为4组(n=10)。采用小鼠股四头肌三点注射法，每次免疫前24小时注射0.5％盐酸普鲁卡因20μl预处理。三个实验组(T1～T3)：真核表达质粒pES／SS(T1)、pES／2SS-CpG(T2)、pES／2SS+pE-CpG(T3)按剂量20μg／20μl于预处理相同部位注射；1个对照组：生理盐水组(C)注射生理盐水20μl，注射方法同试验组。血浆稀释50倍后ELISA法测定P／N值，以P／N值＞2.0判为阳性。RIA法测定血浆中GH、IGF-I浓度。 用ELISA检测抗体水平和抗体类型，MTT法检测淋巴细胞增殖能力，结果显示：三个实验组抗体阳性率在30.0％～40.0％，均极显著高于生理盐水对照组(P＜0.01)，P／N值最高为3.76，含有CpG的两个实验组效果较好，抗体阳性率均为40.0％，但与pES／2SS免疫组30.0％比较差异不显著；三个疫苗组的淋巴细胞增殖能力极显著高于生理盐水对照组(P＜0.01)，含有CpG的两个实验组SI值虽高于pES／SS组，但差异不显著。这些结果表明，应用CpG DNA序列可以增强生长抑素基因疫苗的免疫效果。 3．含CpG生长抑素基因免疫对小鼠生长及生长相关激素的影响 免疫后2、4周，含有CpG序列的T3组雌性小鼠增重速度最快，显著高于生理