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软枣猕猴桃被人们称为“第三代水果之王”,因酸甜适口且富有保健功效而备受追捧,对其相关探索研究也是研究的热潮。精油是植物中常见的天然产物,广泛用于食品、医疗、美容等行业,在日常生活中随处可见,不同精油由于组成差异极大,功效不一,目前对于软枣猕猴桃精油的研究还较为稀少。前期试验中首次发现软枣猕猴桃中含有角鲨烯这一珍贵成分,因此本研究以软枣猕猴桃精油和角鲨烯的提取纯化及生物活性等方面为切入点对其进行探索,得到以下几方面的进展:1.本研究利用水蒸馏法、复合有机溶剂法和超声波辅助法分别提取软枣猕猴桃精油。水蒸馏法的提取率为1.04%,所得精油颜色较浅,易挥发;复合有机溶剂法提取率极高,为35.9%,精油呈黄褐色颜色;超声波辅助法在料液比1:5、超声功率400 W、超声时间180 min条件下有最大提取率,达9.02%,精油颜色极浅。三种方式的提取率差异较大,且直观性状也有明显不同。2.本研究对精油的密度、含水率等常规理化性质和化合物组成进行了测定。水蒸馏法精油密度为0.785 g/mL,共鉴定出36种成分,占总量的87.82%,代表化合物为乙酸丁酯、1,3-二甲基苯等包含酯类、烷烃及芳香族化合物。复合有机溶剂法精油密度0.954g/mL,分析出60种化合物,占总量的95.15%,其中包含如亚油酸和角鲨烯等烯烃和脂肪族化合物。超声波辅助提取法精油的密度为0.916 g/mL,共鉴定出56种化合物,占总量的82.09%,以长链烷烃、烯烃和醇类化合物为主,包括角鲨烯、γ-谷甾醇等。三种精油理化性质的不同可从成分差异性方面得到合理解释,这也说明了不同提取方式对精油组成和品质方面影响极大,此外我们首次在软枣猕猴桃精油中发现角鲨烯这一珍贵成分。3.本研究对精油的生物活性进行了测定。抗氧化性能测试结果显示:水蒸馏法精油对DPPH自由基、羟自由基及超氧阴离子自由基清的最高清除率分别为61.28%、68.38%和51.97%;复合溶剂法提取精油的最高清除率为70.48%、79.03%和60.44%;超声波辅助法精油为67.21%、73.04%和55.24%。抗菌性能测试结果显示:精油不能抑制革兰氏阴性菌大肠杆菌,而对另两种革兰氏阳性菌较为有效。水蒸馏法精油对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最低抑制浓度(MIC)均为3.2 mg/mL,半抑制浓度(IC50)分别为0.601 mg/mL和0.866 mg/mL;复合有机溶剂法精油的MIC值分别为3.2 mg/mL和1.6mg/mL,IC50值较低分别为0.469 mg/mL和0.589 mg/mL;超声波辅助法所得精油对两这种革兰氏阳性菌MIC值也均为3.2 mg/mL,IC50值略高于复合有机溶剂法挥发油为0.536 mg/mL和0.677 mg/mL。抗肿瘤性能测试结果显示:精油浓度和反应时间两方面因素都会影响肿瘤细胞的抑制情况,水蒸馏法精油对HT-29细胞、PC-3细胞和A549细胞的最大抑制率分别为50.63%、57.37%和55.12%;复合有机溶剂法精油的最大抑制率分别为78.63%、57.31%和60.42%;超声波辅助法精油为70.63%、65.31%和63.42%。4.本研究通过皂化提取法从软枣猕猴桃籽油中分离出角鲨烯粗品,并经柱层析纯化,样品通过薄层层析和高效液相色谱定性,再通过GC-MS进行定量检测。结果显示:皂化法粗提取率为11%,纯化后样品中角鲨烯含量可达95.3%,经计算后软枣猕猴桃籽油中的角鲨烯含量为3.41%,样品与质谱库中角鲨烯特征峰相吻合,确定为角鲨烯。5.本研究对角鲨烯进行了生物活性测试。抗氧化结果显示角鲨烯对三种自由基的最高清除率分别可达75.66%、82.41%和84.1%。抗菌试验结果与精油类似,对于革兰氏阳性菌表现较好,金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最低抑制浓度均为3.2 mg/mL,IC50值分别为0.663 mg/mL和0.713 mg/mL,而对以大肠杆菌为代表革兰氏阴性菌效果不佳。抗肿瘤试验中,角鲨烯对SCG-7901细胞、A549细胞和SiHa细胞都有一定的抑制作用,IC50值分别为2.79 mg/mL、7.73 mg/mL和3.33 mg/mL,可知角鲨烯对A549细胞和SCG-7901细胞的抑制作用好于SiHa细胞。